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随着小鼠胚胎干细胞诱导的研究越来越受到关注,各实验室利用不同培养基建立了不同多能性状态的干细胞系,包括由本实验室利用四种小分子化合物ABCL(Activin A、BMP4、CHIR99021和mLif)诱导类胚层干细胞系(AFSCs)获得的新型胚胎干细胞系ASCs(Advanced Stem Cells).在本文中,将ASCs分别在添加细胞因子ActivinA/bFGF(简称AF)和FGF4/Heparin(简称FH)的培养基中连续培养10代以上,以检测不同时期胚胎来源的新型胚胎干细胞ASCs向类胚层胚胎干细胞(AFSCs)和滋养层胚胎干细胞(TSCs)的转化能力.利用2i/Lif培养的胚胎干细胞(ESCs)作为对照组,将培养组分别简称为ASCs-AF、ESCs-AF、ASCs-FH和ESCs-FH.具体结果如下：1、碱性磷酸酶(AP)染色结果显示,ASCs-AF、ASCs-FH、ESCs-AF和ESCs-FH组的染色强度依次减弱;2、免疫荧光染色的结果显示,ASCs-AF组和ESCs-AF组中细胞的Oct4表达水平相近;Gata4和Gata6在ASCs-FH组、ESCs-FH组中细胞的表达水平无显著差异,但均高于ASCs-AF组和ESCs-AF组;3、RT-qPCR检测结果显示,除了ASCs-FH组的Sox2和Nanog在诱导后期表达有一定程度的升高,以及ESCs-AF的Oct4在诱导后期小幅上调之外,ASCs-AF和ESCs-FH中的多能性基因均显著下降;且ESCs-AF和ESCs-FH中的TSC相关基因(如Eomes,Cdx2和Xist)的表达水平均高于ASCs-AF和ASCs-FH组;4、核型分析结果显示,ASCs在不同培养液ABCL、AF和FH的培养和诱导过程中,均未见明显异常.综上所述,在诱导和维持小鼠新型胚胎干细胞ASCs的过程中,四个小分子化合物ABCL中的Activin A至关重要.从标记基因的变化可以看出(如TSC的相关基因Eomes,Cdx2等),ASCs和ESCs在体外分别向AFSCs、TSCs的转化程度有所不同,但二者的转化能力是否存在显著差异仍需进一步的实验验证.