目的:胞外多糖是变异链球菌最重要的致龋毒力因子,变异链球菌rnc基因与细菌生物膜胞外多糖代谢、致龋力以及RNA转录后调控密切相关。本课题系列研究围绕变异链球菌rnc基因,拟从多个层面消解调控胞外多糖从而达到控制牙菌斑、防治龋病发生的目的。方法:构建变异链球菌rnc基因缺失株,渗透凝胶色谱以及全水解乙酰化测定生物膜细菌胞外多糖小分子单糖组份比例;重组表达rnc基因编码核酸内切酶RNaseⅢ,初步探究RNaseⅢ的酶活性;rnc基因可依赖msRNAs对VicRKX转录体系进行调控,进一步利用T4-RNA连接酶体系研究具有发卡结构msRNAs与vicR 5’UTR区域的结合关系,进而对于胞外多糖代谢的调控效应。结果:小分子单糖组份比例结果示rnc基因缺失株葡萄糖单糖含量显著降低,提示多糖分子内部连接方式的改变从而影响多糖结构;重组表达编码核酸内切酶RNaseⅢ,具有降解RNA活性;"嵌合物"实验首次验证msRNA与vicR 5’UTR区域结合,抑制vicR基因转录从而发挥对胞外多糖调节作用。结论:本研究提示以rnc基因为靶点,通过多层面改建胞外多糖结构/组分为消解牙菌斑生物膜以及龋病防治提供理论依据和新思路。