【摘 要】
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目的:筛选LPLUNC1基因转染鼻咽癌5-8F细胞前后差异表达的蛋白质,进一步揭示LPLUNC 1的抑瘤分子机制。方法:建立稳定表达LPLUNC 1的鼻咽癌5-8F细胞系,采用荧光差异凝胶电泳(DI
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目的:筛选LPLUNC1基因转染鼻咽癌5-8F细胞前后差异表达的蛋白质,进一步揭示LPLUNC 1的抑瘤分子机制。方法:建立稳定表达LPLUNC 1的鼻咽癌5-8F细胞系,采用荧光差异凝胶电泳(DIGE)和质谱(MALDI-TOF-MS)分析技术分离鉴定LPLUNC1基因转染鼻咽癌5-8F细胞前后的差异表达蛋白质,定量RT-PCR、Western blot及免疫组织化学技术验证部分差异表达的蛋白。结果:建立了LPLUNC1基因转染鼻咽癌5-8F细胞前后的差异表达蛋白质谱,共鉴定出52个差异蛋白质点,其中上调蛋白质为23个,下调蛋白质为29个,这些差异蛋白质涉及细胞代谢、增殖、翻译、信号转导等众多事件。Western blot和定量RT-PCR及免疫组织化学对部分差异蛋白进行了验证,与蛋白质组学结果一致。结论:发现了一些受LPLUNC1基因调控并与肿瘤细胞增殖、黏附、趋化和侵袭等生物学过程相关的差异表达蛋白质,对这些蛋白的功能进一步研究,将有助于揭示LPLUNC1的抑瘤分子机制。
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