【摘 要】
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目的:脊髓损伤(SCI)是一种病情严重、预后不良的中枢神经系统疾病,当前对脊髓损伤的治疗,并没有十分完善的方法.脊髓损伤后由于神经细胞的大量死亡,以及髓鞘和胶质瘢痕释放的
【机 构】
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广州市中山二路58号中山大学附属第一医院转化医学研究中心510080
【出 处】
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中国病理生理学会第十四届肿瘤专业委员会、第十五届免疫专业委员会联合学术会议
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目的:脊髓损伤(SCI)是一种病情严重、预后不良的中枢神经系统疾病,当前对脊髓损伤的治疗,并没有十分完善的方法.脊髓损伤后由于神经细胞的大量死亡,以及髓鞘和胶质瘢痕释放的髓磷脂相关抑制因子的存在,导致无法恢复应有的神经功能.因此,如何促进脊髓损伤后神经轴突的再生,是当前脊髓损伤修复的主要目标.干细胞移植补充损伤的神经细胞,同时拮抗轴突内存在的生长抑制因子已成为治疗脊髓损伤的有效手段。
方法:SD大鼠胎鼠来源的NSCs培养并鉴定,荧光显微镜下观察及流式细胞术检测以确定Lingo-1 shRNA慢病毒载体的最佳复染指数(MOI)Hochest染色检测细胞凋亡。
结果:1.MOI=20是体外转染大鼠NSCs的最佳复染指数。2.Lingo-1 shRNA慢病毒载体能下调Lingo-1和RhoA蛋白的表达,且加入Lingo-1 shRNA慢病毒组的NeuN的蛋白表达明显增加,而CNPase和GFAP的蛋白表达无明显变化。3.Notch信号通路抑制剂DAPT能使Notch通路的有效成分NICD的表达明显下调,下游Hesl,Hess等的基因表达也受到抑制,Lingo-1,NeuN,CNPase和GFAP的蛋白表达均增加。
结论:1.Lingo-1 shRNA慢病毒载体能成功转染大鼠的神经干细胞,并促进其向神经元的分化,其作用机制可能与抑制下游RhoA信号通路的转导相关。2.DAPT能抑制大鼠神经干细胞的Notch信号通路,并促进其向神经元、少突胶质细胞和星形胶质细胞的分化。
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