葡萄AGAMOUS-like MADS-box基因的克隆与表达特性研究

来源 :第二届全国果树分子生物学学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bear_flysky
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
根据获得的MADS-box基因片段设计一条特异引物,通过3RACE方法获得了全长cDNA,命名为VvAG(GenBank登录号:EF209334)。该片段全长978bp,包含一个681 bp的开放阅读框,编码226个氨基酸残基。通过设计特异引物RT-PCR扩增得到了编码区全长cDNA。推导的氨基酸序列与拟南芥的AGAMOUS类MADS-box基因AG、SHPI/SHP2均有较高的同源性(同源性分别为770.9%、710.2%、690.9%)。系统发育分析将VvAG基因归入MADS-box基囚家族AG亚家族的euAG进化系。半定晕RT-PCR分析显示,该基因在葡萄的叶片、卷须、休眠芽、花序、果实中均表达,并且在花器官的萼片、花瓣、雄蕊、雌蕊中也均检测到VvAG的表达,而且在这些组织中的表达丰度均较高。通过将VvAG与一个葡萄shotgun基因组序列(AM478968)比对发现其基因组从起始密码子到终止密码子全长7534 bp,由7个外显子和6个内含子组成。
其他文献
本研究利用通用引物ITSl和ITS4对南瓜疫病菌(Phytophthora capsicy)的19个菌株的ITS rDNA进行扩增,然后利用4种限制性内切酶(Hinf Ⅰ、HaeⅢ、EcoRⅠ、HindⅢ酶切PCR扩增产物,分析各菌株间的DNA限制性片段多态性。运用ITS通用引物在所有供试南瓜疫病菌菌株上均可扩增到一条长为575bp的特异DNA片段。经限制性内切酶酶切和聚类分析,把黑龙江省南瓜疫病
对86份南瓜品种资源的主要农艺性状进行了鉴定,并采用高效液相色谱技术,对各品种的肌醇含量进行了检测,从中筛选出18份富肌醇兼具不同优异农艺性状的品种资源。其中,甜布丁的肌醇含量高达16.44mg/g,比普通品种高约5倍。小茄克、蜜糖罐和双桃等的肌醇含量分别高达14.52mg/g、12.4mg/g和11.9mg/g,比普通品种高出3倍以上,是开展富肌醇南瓜新品种选育的优良亲本种质材料。
为选育优质小果型青皮西洋南瓜良种,以引进西洋南瓜品种的分离后代中选育的自交系A156为母本、A257为父本进行杂交,于2008年育成早熟、优质、丰产的小果型西洋南瓜新组合。经品比试验、多点中间试验和生产示范试验,结果表明:该组合全生育期89d,春季栽培果实发育期约35d。平均单瓜重0.7kg,产量2100kg/667m2左右,果实扁圆形,青皮,果肉黄色,平均肉厚2.0cm,质粉味甜,种子白色小粒,
利用L43正交设计对影响南瓜SRAP反应体系的MgCl2浓度、dNTPs浓度、Taq酶含量、引物浓度、模板DNA浓度5个因素进行了筛选,快速得到稳定性和重复性好的南瓜SRAP扩增体系。另外对复性温度、PCR循环次数等影响南瓜SRAP扩增结果的重要因素进行了优化。最终优化的南瓜SRAP反应体系为25μL反应液中:10×buffer2.5μL,0.2mmol/L dNTPs,引物0.2μmol/L,1
以亚洲百合顶芽形成的丛芽体为材料,进行试管小鳞茎诱导及小鳞茎培育开花球研究。结果表明:激素、蔗糖、光照强度及低温处理等因素影响小鳞茎诱导,丛芽在MS+IBA 0.5 mg/L+4%蔗糖培养基上,光照强度1.5 klx培养30d后,小鳞茎诱导率100%,平均每株诱导小鳞茎1.5个,小鳞茎直径0.96 cm;小鳞茎经5℃低温处理2周后再生形成的鳞茎,移栽后继续生长2个月后才开始休眠。直径0.8 cm以
以东方百合Siberia为材料,研究了ABA及其抑制剂Fluridone对试管鳞茎形态发育及休眠的影响,结果表明:在光照培养条件下,外源ABA对鳞片叶生成具有显著的抑制作用。Fluridone可以降低鳞茎的休眠程度,当外源ABA与其同时存在时,Fluridone这种降低鳞茎休眠程度的作用会被逆转,说明外源ABA可以促进鳞茎休眠。鳞茎的休眠程度在15℃、20℃、25℃培养条件下会随温度丁}高而加深,
百合枯萎病是危害百合生产较为严重的病害,为有效防治该病害,选育抗性品种是较好的方法,而采用百合无性系进行离体筛选可加速抗病品种的培育。本研究以百合品种元帅‘Acapulco’、卡萨布兰卡‘Casa Blanca2个品种的愈伤组织为试验材料,附加不同浓度的镰刀菌粗毒素用于突变体的筛选,结果表明:在含毒素浓度为75%的培养基上,百合愈伤组织的存活率均小于30%,因此,75%的毒素浓度可以作为百合抗镰刀
以彩色马蹄莲种球为材料,研究6℃冷藏4周、8周、12周、16周后,种球的生长及养分代谢情况;同时研究6℃冷藏6周、9周、12周、18周时种球的蔗糖、可溶性总糖、淀粉代谢和α-淀粉酶活性变化。结果表明,6℃冷藏时间越长,种球栽培后生长越快,至开花时间越短,冷藏12周后花晶质降低;栽培60d时,经4周冷藏的种球淀粉含量最高,经12周冷藏的种球可溶性总糖含量最高。彩色马蹄莲种球冷藏12周后的可溶性总糖含
以常规离体继代培养的转豇豆胰蛋白酶抑制剂(Cowpea TrypsinInhibitor,CpTI)基因苹果(Malus domestica Borkh0.)(包括皇家嘎拉、王林、乔纳金和红富士60个株系)组培苗为试材,应用卡那霉素筛选,PCR扩增对其外源基因的稳定性进行研究。结果表明:在60个常规继代培养6~8年的转CpTI基因苹果转化株系中均可检测出CpTI特异基因片断;除2个转化株系在50
利用具有高多态信息含量,基于限制性内切酶和简单重复序列的分子标记技术筛选两个中国李品种间的差异,电泳后从聚丙烯酰胺凝胶上回收差异片段,测序后设计一条引物与微卫星引物配对使用,即可将其转化为微卫星特异标记(当然也是SCAR标记)。结果从小黄李中分离的一条与盖县大李的差异片段,被成功转化为区分这两个品种的特异微卫星标记。