表达传染性支气管炎病毒S1基因重组禽痘病毒的构建

来源 :中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shushuclover1
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将鸡传染性支气管炎病毒S1基因插入到鸡痘病毒转移载体pSY681中,获得重组转移载体pSY681-IBVS1.将pSY681-IBVS1转染已感染亲本鸡痘病毒S-FPV-017株的鸡胚成纤维细胞,使其在鸡胚成纤维细胞内与鸡痘病毒基因组发生同源重组,产生表达鸡IBVS1蛋白的重组鸡痘病毒rFPV-IBVS1.在含有X-gal的营养琼脂培养基上进行蓝斑筛选且进一步纯化14代.S1基因的PCR检测表明,获得的含传染性支气管炎病毒S1基因的重组鸡痘病毒能够稳定遗传,间接免疫荧光和Western-blot等试验证实该重组病毒在CEF内真实地表达了分子量约为90ku的具有免疫学活性的IBVS1糖蛋白。
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