【摘 要】
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目的:猪细环病毒1型(TTSuV1)是一种新近发现的具有潜在致病性的DNA病毒,猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由PRRS病毒(PRRSV)引起的一种严重危害养猪业的传染病.本研究用SYBR Green
【机 构】
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北京市房山区动物疫病预防控制中心,北京102400
【出 处】
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第十一届北京畜牧兽医青年科技工作者“新思想 新观点 新方法”论坛
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目的:猪细环病毒1型(TTSuV1)是一种新近发现的具有潜在致病性的DNA病毒,猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由PRRS病毒(PRRSV)引起的一种严重危害养猪业的传染病.本研究用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法检测PRRS病猪和PRRSV亚临床感染猪的血清中PRRSV和TTSuV1载量,分析二者之间的差异和相互关系,来探讨TTSuV1感染与PRRS发生之间是否存在相关性.
方法:根据TTSuV1基因保守序列设计了一对特异性引物,扩增并构建含有TTSuV1基因片段的重组质粒,以系列稀释后的重组质粒作为模板来建立特异性强、灵敏度高、重复性好的TTSuV1 SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法.采集40头临床疑似PRRS病猪血清和40头同群健康猪血清,RT-PCR方法检出有34头疑似PRRS病猪和28头同群健康猪为PRRSV阳性.用TTSuV1、PRRSV的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法分别检测PRRS病猪与PRRSV亚临床感染猪的血清中TTSuV1和PRRSV载量.
预期结果:PRRS病猪血清中PRRSV载量显著高于PRRSV亚临床感染猪;PRRS病猪血清中TTSuV1载量高于PRRSV亚临床感染猪;PRRSV感染猪的TTSuV1载量与PRRSV载量之间存在相关性,提示TTSuV1与PRRS发生可能有关联.
创新点:建立了1种特异性强、敏感性高、重复性好的TTSuV1 SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法.
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