【摘 要】
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绿脓杆菌是引发医院内部感染的主要致病病原体之一,其细胞膜外排泵基因mexAB-oprM操纵元是引起绿脓杆菌产生多药耐药性的重要途径之一.在前期研究的基础上,利用Thermal shift
【机 构】
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南京大学化学化工学院,配位化学国家重点实验室,江苏省南京市汉口路22号,210093
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绿脓杆菌是引发医院内部感染的主要致病病原体之一,其细胞膜外排泵基因mexAB-oprM操纵元是引起绿脓杆菌产生多药耐药性的重要途径之一.在前期研究的基础上,利用Thermal shift assay分析了12种抗生素与外排泵转录调控因子之一NalD蛋白质结合的稳定性,成功地筛选出对NalD蛋白质热稳定性有较大影响的新生霉素(Novobiocin),并利用微量量热滴定法(ITC)测定了两者的亲和力;随着NalD蛋白质单晶的获得、凝胶迁移实验(EMSA)以及相关基因敲除菌株的表型实验进一步揭示了当NalD蛋白与新生霉素结合后,其蛋白质结构发生变化,减弱了其与启动子区域DNA结合的活力,从而激活mexAB-oprM多药耐药外排泵的转录,产生多药耐药性.
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