刚地弓形虫(Toxoplasma gondii,T.gondii)作为一种重要的人畜共患病病原,目前还没有有效的疫苗。本研究从刚地弓形虫的排泄分泌抗原(Excretory/Secretoryantigens,ESA)中筛选刚地弓形虫生长发育的关键蛋白,选取原癌基因Rab18、核糖体蛋白SIR2及蛋白酶体亚单位PSMB1进行原核表达并免疫小鼠。通过ELISA技术、流式细胞检测技术及绘制小鼠的生存曲线对上述重组蛋白的免疫效果进行评价。获得结果如下,成功构建了Rab18、SIR2及PSMB1的原核表达载体,获得了纯化的重组蛋白,且均能被感染刚地弓形虫的大鼠血清识别,并能检测到天然状态下这三种蛋白的存在。在ELISA检测中,rSIR2可促进小鼠分泌IFN-γ(P<0.01),rPSMB1可促进小鼠分泌IL-17 (P<0.01);在小鼠脾脏T细胞亚类检测中,rRab18及rSIR2可促进MHCI及MHCⅡ分子的表达(P<0.01);腹腔感染100个刚地弓形虫RH株后,对照组小鼠均在16天内全部死亡,免疫rRab18小鼠的存活时间与对照组相同,免疫rPSMB1及rSIR2小鼠的存活时间被延长1天,三种重组蛋白免疫小鼠的开始死亡时间延后1天。以上结果显示,刚地弓形虫重组蛋白Rab18及SIR2在刚地弓形虫入侵机体过程中发挥着重要作用,能够激起小鼠产生体液免疫和细胞免疫,可作为预防治疗刚地弓形虫病的蛋白疫苗候选分子。