【摘 要】
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目的 采用实时定量PCR技术检测小鼠胸腺CCND1基因表达对X射线全身照射的反应,为探索可行的辐射生物标志物打下实验基础.方法 随机将ICR小鼠分为4h和24h两组.每组再分6个
【机 构】
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吉林大学公共卫生学院,长春 130021
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目的 采用实时定量PCR技术检测小鼠胸腺CCND1基因表达对X射线全身照射的反应,为探索可行的辐射生物标志物打下实验基础.方法 随机将ICR小鼠分为4h和24h两组.每组再分6个剂量点,单次全身照射剂量分别为0 Gy、0.5 Gy、1 Gy、2 Gy、4 Gy和6Gy,剂量率为0.488Gy/min.照射后预定时间点颈椎脱臼处死小鼠,迅速取出胸腺后,用RNAiso Plus提取组织总RNA,采用RNA反转录试剂盒合成相应的cDNA,实时定量PCR检测CCND1基因相对表达量的变化.结果 小鼠受照后4h,Cyclin D1基因的表达在0.5Gy下降,1.0Gy开始上升,4Gy时达到最大值,是对照组的2.35倍,6Gy时CCND1基因的表达不再增加,拟合成二次曲线方程为Y=0.793+00.597X-0.555X2(r=0.997,P＜0.01)；小鼠受照后24h,CCND1基因的表达在0.5Gy和1.0Gy下降,2Gy时开始升高,但与对照组无统计学差异(P＞0.05),4Gy时达最高,是对照组的3.17倍,并与对照组具有统计学差异(P＜0.05),6Gy时开始出现回落,但仍高于对照组,是对照组的1.6倍,且具有统计学差异(P＜0.05),拟合成二次曲线方程为Y=0.474+1.904X-1.445X2(r=0.854,P＞0.05).结论 在一定的剂量范围内和一定的检测时间点,电离辐射能够引起小鼠胸腺细胞周期蛋白CCND1基因的过度表达,并具有一定的剂量效应关系,通过检测CyclinD1基因的表达情况可以反映出受照剂量,但是否可作为辐射生物标志物尚需作进一步的研究.
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