【摘 要】
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目的：研究黄皮基因组DNA的提取方法，并优化ISSR-PCR反应体系。方法：采用改良SDS法提取DNA。通过单因素和正交试验对ISSR-PCR反应体系进行优化。结果：采用改良SDS法提取的DNA条带完整、无RNA污染，适于ISSR-PCR扩增。同时建立了最适黄皮ISSR分析的扩增体系：20μL的反应体系中含30 ng的模板DNA、1.5 u Taq DNA聚合酶、0.4 μmoI0.L-1引物、0
【机 构】
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福建农林大学园艺学院,福州 350002 福建农林大学园艺产品贮藏保鲜研究所,福州 350002
【出 处】
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第二届全国果树分子生物学学术研讨会
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目的：研究黄皮基因组DNA的提取方法，并优化ISSR-PCR反应体系。
方法：采用改良SDS法提取DNA。通过单因素和正交试验对ISSR-PCR反应体系进行优化。
结果：采用改良SDS法提取的DNA条带完整、无RNA污染，适于ISSR-PCR扩增。同时建立了最适黄皮ISSR分析的扩增体系：20μL的反应体系中含30 ng的模板DNA、1.5 u Taq DNA聚合酶、0.4 μmoI0.L-1引物、0.3mmol0.L-1dNTPs以及引物(gA)8C的最佳退火温度为520.4℃。
结论：建立了黄皮ISSR-PCR反应体系，确定了引物的最佳退火温度，为应用ISSR分子标记对黄皮种质资源、分子标记辅助选择育种及其遗传多样性研究奠定了基础。
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