【摘 要】
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以实验室保藏的一株产L-色氨酸的大肠杆菌KC102为出发菌株,采用摇瓶方法,对其进行发酵培养基的优化.本文应用数据软件Design-Expert.8.05b,利用响应面法将培养KC102的原始培
【机 构】
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福建师范大学生命科学学院,福州350108
【出 处】
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华东六省一市生物化学与分子生物学会2015年学术交流会
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以实验室保藏的一株产L-色氨酸的大肠杆菌KC102为出发菌株,采用摇瓶方法,对其进行发酵培养基的优化.本文应用数据软件Design-Expert.8.05b,利用响应面法将培养KC102的原始培养基进行组分优化.首先,利用液体完全培养基进行菌株活化;然后,利用250ml有挡板的三角瓶进行最后的发酵培养,发酵周期为40h.完成单因素实验,应用P-B筛选出对基础发酵培养基的发酵液中L-色氨酸产量影响显著的因素,进一步通过最陡爬坡实验、B-B实验对影响显著的因素进行优化.利用单因素实验,确定了有利于L-色氨酸的最佳培养基组分包括葡萄糖,酵母浸粉,硫酸铵,柠檬酸三钠二水物,硫酸镁,磷酸二氢钾以及硫酸亚铁.最后,运用软件中的Box-Benhnken的响应面分析及中心组合设计,对KC102产L-色氨酸的的发酵培养基组分进行了多形式回归模型建立及最优化,以此建立产L-色氨酸菌株的最优培养基组成:每1L的培养基:葡萄糖20g,酵母浸粉5.0g,硫酸铵6.0g,柠檬酸三钠二水物3.0g,硫酸镁3.0g,磷酸二氢钾11.5g,硫酸亚铁66mg.利用基础培养基培养KC102,L-色氨酸的产量可达到1.45g/L,与优化前的培养结果相比,L-色氨酸的产量达到2.64g/L,优化结果提高了82.07％.利用响应面法对培养基组分进行优化可显著提高L-色氨酸产量,是一种快捷有效的优化方法.
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