【摘 要】
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由于microRNA在细胞内的含量少,序列短,相似性高等难点,使得灵敏地检测microRNA面临很多的技术挑战.本文将DNA四面体纳米结构修饰到电极表面,增强表面分子的结合能力,同时采用杂交链式反应(HCR)放大信号,发展一种超灵敏的microRNA检测方法.这种方法能检测低至100 aM的DNA和10 aM的microRNA(相当于100μL体系里只有600个microRNA分子).被广泛使用的
【机 构】
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中国科学院上海应用物理研究所物理生物实验室,上海,201800
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由于microRNA在细胞内的含量少,序列短,相似性高等难点,使得灵敏地检测microRNA面临很多的技术挑战.本文将DNA四面体纳米结构修饰到电极表面,增强表面分子的结合能力,同时采用杂交链式反应(HCR)放大信号,发展一种超灵敏的microRNA检测方法.这种方法能检测低至100 aM的DNA和10 aM的microRNA(相当于100μL体系里只有600个microRNA分子).被广泛使用的超级夹心放大方法相比，该方法对检测灵敏度能提高3个数量级。这是因为检测平台克服了超级夹心法中探针在表面不受控制、放大时消耗靶标分子的缺点，提高了放大效率。利用DNA纳米技术的优势，采用三维四面体的DNA纳米结构作为基底固定DNA识别探针，增加界面间传质过程，及提高目标分子与识别探针的结合能力;同时，利用HCR形成的DNA纳米天线能有序的结合多重酶分子，实现有效的信号放大。因此，这种DNA四面体和纳米天线的协同作用极大的提高了检测DNA和microRNA的灵敏度。
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