论文部分内容阅读
猪繁殖与呼吸综合征给养猪业造成了巨大的经济损失，是危害养猪业的重要传染病之一。由于现有疫苗不能提供完全的保护，猪免疫后仍能感染PRRSV。持续性感染可能是控制该病的一个最大的障碍。对于一些病毒来说，如HIV、SIV和HBV，“糖基屏蔽效应”可能是病毒逃避中和免疫应答的一个主要机理，使得病毒在体内持续感染。本研究的目的就是构建表达单个或多个糖基化位点突变的PRRSV GP5的重组腺病毒，并评估它们的表达以及诱导BALB/c小鼠产生的免疫应答。共构建了5株重组腺病毒，分别表达突变GP51-4个糖基化位点的突变体：N44S、N44/51S、N30/44/51S、N30/33/44/51S和N30/33S。小鼠免疫试验结果为：5株表达GP5糖基化位点突变的重组体均可诱导产生较高水平的抗PRRSV ELISA抗体，中和抗体水平明显高于野生型GP5重组腺病毒，说明，4个糖基化位点都能影响到GP5蛋白诱导中和抗体的能力。而且，rAd-GP5N30/N33S诱导的中和抗体滴度高于rAd-GP5N44S、rAd-GP5N44/51S、rAd-GPSN30/N44/51S，而低于rAd-GP5N30/N33/N44/51S，由于N30和N33残基上的糖基靠近GP5蛋白的非中和表位(aa27～30)，说明N30和N33这2个位点对诱导中和抗体非常重要。此外，野生型GP5和糖基化位点突变体诱导的淋巴细胞增殖应答没有明显的差异，说明4个糖基化位点对GP5蛋白细胞免疫特性无明显影响。这些糖基化位点突变的GP5蛋白有助于了解这些糖基对GP5蛋白免疫特性的影响，为开发新的PRRSV疫苗提供了新的思路和方法。