【摘 要】
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目的 观察小胶质细胞诱导表达尼克酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)及NAMPT 对小胶质细胞激活的影响,并探讨NAMPT 介导小胶质细胞激活的机制。方法 ①大鼠局灶性脑缺血再灌注处理(MCAO 1h/R 14 d)后,脑片免疫荧光染色观察NAMPT 在小胶质细胞的表达；②以BV2 细胞替代小胶质细胞,以缺糖缺氧再恢复(OGD/R)模拟脑缺血处理后,以PCR 和ELISA 分别检测细胞表达和释放NAM
【机 构】
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浙江大学医学院药理学系,浙江杭州310058
【出 处】
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第十七届全国神经精神药理学学术会议
论文部分内容阅读
目的 观察小胶质细胞诱导表达尼克酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)及NAMPT 对小胶质细胞激活的影响,并探讨NAMPT 介导小胶质细胞激活的机制。方法 ①大鼠局灶性脑缺血再灌注处理(MCAO 1h/R 14 d)后,脑片免疫荧光染色观察NAMPT 在小胶质细胞的表达；②以BV2 细胞替代小胶质细胞,以缺糖缺氧再恢复(OGD/R)模拟脑缺血处理后,以PCR 和ELISA 分别检测细胞表达和释放NAMPT；③ 以重组人NAMPT 蛋白模拟细胞释放的NAMPT,NAMPT 蛋白单独或者合并TNF-α蛋白处理BV2细胞后,光镜下观察细胞形态变化；以ELISA 检测细胞释放TNF-α,IL-6 和NAMPT 的量；以Western 蛋白印迹法检测胞浆与核内NF-κB 的水平变化；④以OGD 1 h/R 24 h 诱导BV2 细胞上调表达NAMPT,以NAMPT 酶活性特异性抑制剂FK866 处理细胞,观察BV2 细胞的形态变化,以ELISA 和Western 蛋白印迹法分别检测TNF-α,NAMPT,IL-6 释放量及胞浆与核内NF-κB 的表达变化；⑤以FK866 侧脑室注射预给药,大鼠局灶性脑缺血再灌注处理(MCAO 1 h/R 14 d)后,以行为学检测反映大鼠神经功能损伤/恢复情况,脑片免疫组化、免疫荧光染色观察神经元存活、星形胶质细胞及小胶质细胞激活情况。
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