【摘 要】
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环介导等温扩增技术由于其独特的优点,近年来被大量应用于水产养殖病原生物的检测中.但是在实际生产应用中,环介导等温扩增反应混合物存在着多种成分需在低温下储存,不能反复冻融;且在贮存和运输过程中保存期限较短等缺点.为了解决这些问题,用冷冻干燥的方法处理环介导等温扩增反应混合物,并通过在混合物中添加不同量海藻糖(5％,10％,15％)的方法保护混合物的酶活性.试验结果表明:15％海藻糖组在冷冻干燥过程中
【机 构】
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上海海洋大学水产与生命学院,上海201306;中国水产科学院黄海水产研究所海水养殖生物疾病控制与分子病理学实验室,山东青岛266071
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环介导等温扩增技术由于其独特的优点,近年来被大量应用于水产养殖病原生物的检测中.但是在实际生产应用中,环介导等温扩增反应混合物存在着多种成分需在低温下储存,不能反复冻融;且在贮存和运输过程中保存期限较短等缺点.为了解决这些问题,用冷冻干燥的方法处理环介导等温扩增反应混合物,并通过在混合物中添加不同量海藻糖(5％,10％,15％)的方法保护混合物的酶活性.试验结果表明:15％海藻糖组在冷冻干燥过程中以及之后的储存过程中都表现出最好的保护效果.在4℃储藏条件下,反应混合物的保存时间从1个月增加到至少3个月;在25℃储藏条件下,反应混合物的保存时间从12 d增加到至少3个月;37℃下混合物保存期限延长1倍.在冷冻干燥的环介导等温扩增反应混合物中添加适量海藻糖有助于延长混合物的保存时间,适当提高储藏温度.该结果可为生产大规模的商品化LAMP检测试剂盒提供依据.
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