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建立了一种快速、高灵敏度的离子对(Ion-pair)反相液相色谱(IP-RPLC)-电喷雾-高分辨质谱联用(IP-RPLC-ESI-TOF)分析产黄青霉次级代谢相关物质的方法.在IP-RPLC上进行分离条件的优化,使用的分析柱为Waters Symmetry C18反相柱(3.5μm,100 mm×2.1 mm).该方法成功鉴定到产黄青霉菌青霉素合成路径中的8个关键代谢产物.在对样品进行固相萃取前加入一定浓度的青霉素V作为内标,对相关代谢物进行定量分析.所建立的方法已经成功用于产黄青霉相关次级代谢物的分析和鉴定.