【摘 要】
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为鉴定序列推导的新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)P18基因是否存在,本研究采用RT-PCR扩增获得NDRV TH11株推导的P18基因,将其亚克隆至原核表达载体pCold-TF,表达并纯化获得P18重
【机 构】
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中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第五次学术研讨会
论文部分内容阅读
为鉴定序列推导的新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)P18基因是否存在,本研究采用RT-PCR扩增获得NDRV TH11株推导的P18基因,将其亚克隆至原核表达载体pCold-TF,表达并纯化获得P18重组蛋白.以此重组蛋白为免疫原,制备抗P18的多克隆抗体.Western-blot结果显示,该抗体具有良好的免疫原性.以此制备的抗体为第一抗体,利用IFA和激光共聚焦检测NDRV TH 11株感染细胞后,P18蛋白亚细胞定位及动态分布.结果 显示,在病毒感染后6h,P18蛋白在细胞浆和细胞核中均能检测到,之后P18蛋白的分布以细胞核为主,在感染后30h,P18蛋白在细胞核检测到,而细胞浆里未能检测到；随后细胞崩解.本研究结果证实NDRV第二个ORF编码P18蛋白,为深入探讨P18蛋白入核分子机理提供线索,为临床早期诊断提供依据.
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