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目的:明确一株对氟喹诺酮耐药的福氏志贺菌的分子耐药机制,了解质粒介导喹诺酮耐药基因的遗传结构特征。
方法:通过接合试验了解耐药性是否由质粒介导;用PCR分别扩增染色体和质粒介导的喹诺酮耐药基因并进行序列分析,检测染色体介导耐药的突变位点和质粒介导耐药的基因型;对耐药质粒进行“鸟枪法”随机克隆实验并对插入到克隆载体pACYC184的EcoRI酶切片断进行测序,检测和分析qnrS基因的上下游结构。
结果:福氏志贺菌RJ506染色体DNA旋转酶GyrA亚基的83位发现Ser→Leu突变,该菌株携带质粒介导的喹诺酮耐药基因qnrS;qnrS及其上下游序列的基因结构为“blaLAP-qnrS保守区域-CS12-fgc-like的形式。
结论:本实验首次在国内的志贺菌中检出质粒介导的喹诺酮耐药基因qnrS,其与染色体GyrA亚基83位Ser→Leu突变的联合作用可导致细菌对环丙沙星的耐药;qnrS的起源和扩散可能与插入序列IS有关,其上下游的基因结构主要有两种形式,而我国检出的菌株上述基因结构完全相同。