【摘 要】
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目的:比较不同的孵育时间及感染复数(MOI)下,牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis,P.g.)ATCC33277侵袭人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,HPDLCs)的侵袭效能,并观察
【出 处】
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中华口腔医学会牙体牙髓病学专业委员会第五次全国牙体牙髓病学临床学术研讨会
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目的:比较不同的孵育时间及感染复数(MOI)下,牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis,P.g.)ATCC33277侵袭人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,HPDLCs)的侵袭效能,并观察细菌入侵后在细胞内的分布情况,以及引起细胞形态的变化.方法:将P.g.ATCC33277以感染复数(MOI)为10、100分别感染HPDLCs 90min,8h,24h,48h后,联合使用300μg/mL庆大霉素和100μg/mL甲硝唑杀死胞外细菌,HPDLCs用蒸馏水裂解,将裂解液涂板,厌氧培养14天后观察羊血琼脂培养皿上细菌菌落数.使用荧光共聚焦显微镜观察P.g.ATCC33277在MOI为10时侵入HPDLCs 24h后在细胞内的分布情况,采用扫描电镜观察细胞形态及黏附性能的变化.结果:联合使用300μg/mL庆大霉素和100μg/mL甲硝唑能够彻底杀灭胞外培养基中的细菌而对胞内细菌无影响,共同孵育90min后,活菌能够进入人牙周膜细胞,当MOI为10,共孵育时间为24h时,细菌侵袭细胞的侵袭效能达到最大值.荧光共聚焦显微镜发现牙龈卟啉单胞菌入侵细胞后,主要分布在细胞核周.扫描电镜结果显示:细菌入侵细胞后,细胞间连接断裂,细胞黏附性下降.结论:本研究证明P.g.能够侵入HPDLCs并且引起细胞的结构破坏、黏附性能下降.P.g.可以通过损伤HPDLCs而加重局部的炎症反应,影响牙周组织的修复功能,这可能是牙周炎疾病的病理机制之一.
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