【摘 要】
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目的:研究狼疮定对SLE外周血单个核细胞(PBMC)CD70基因表达及其基因启动子区DNA低甲基化状态的影响.
方法:中药含药血清或正常血清分别处理SLE患者或健康体检者PBMC,RT-PCR
【机 构】
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浙江中医药大学附属第二医院杭州310005浙江中医药大学杭州310053
【出 处】
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2015年第十三届全国风湿病学术会议
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目的:研究狼疮定对SLE外周血单个核细胞(PBMC)CD70基因表达及其基因启动子区DNA低甲基化状态的影响.
方法:中药含药血清或正常血清分别处理SLE患者或健康体检者PBMC,RT-PCR法检测狼疮定对PBMC CD70基因RNA表达的影响;分离样品基因组DNA,变性,重亚硫酸盐处理后DNA纯化、去硫酸化沉淀,设计CD70启动子区去甲基化和甲基化的特异性引物,以甲基化特异PCR方法(MSP)进行CD70基因启动子区DNA甲基化状态检测.
结果:20例SLE患者PBMC体外培养并以10%胎牛血清处理48h后,CD70mRNA表达水平显著高于正常人(P=0.037);含药血清处理48h后的SLE患者PBMC的CD70启动子区甲基化水平较胎牛血清处理48h后显著增高(P<0.0001).
结论:SLE患者PBMC存在低甲基化状态,狼疮定能抑制SLE患者PBMC的CD70基凶表达,并促进CD70基因启动子区DNA的甲基化.
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