【摘 要】
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根据毕赤酵母表达系统对于密码子的偏嗜性，将去除信号肽的猪干扰素α(PoIFN-α)基因重新设计改造和重新合成一段新的核苷酸序列，置于毕赤酵母菌α因子分泌信号的DNA序列后，构建成pPICZαC-PoIFN-α分泌型重组表达载体，电转化进入野生型毕赤酵母菌X-33中，经ZeocinTM抗性筛选后获得大量多拷贝插入的重组子，SDS-PAGE和Western blot分析结果表明，所获得的重组子能够分泌
【机 构】
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华南农业大学 广东 广州 510642 广东大华农动物保健品股份有限公司 广东 新兴 527439
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会
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根据毕赤酵母表达系统对于密码子的偏嗜性，将去除信号肽的猪干扰素α(PoIFN-α)基因重新设计改造和重新合成一段新的核苷酸序列，置于毕赤酵母菌α因子分泌信号的DNA序列后，构建成pPICZαC-PoIFN-α分泌型重组表达载体，电转化进入野生型毕赤酵母菌X-33中，经ZeocinTM抗性筛选后获得大量多拷贝插入的重组子，SDS-PAGE和Western blot分析结果表明，所获得的重组子能够分泌表达出19KD左右的PoIFN-α特异蛋白，表达更容易，其有效蛋白表达量为54.105mg/L，并且经Vero-VSV系统测定，PoINF-α效价达到5.87×10(7)U/L。试验首次将猪干扰素α成熟肽蛋白的全基因密码子进行改造，重新设计实现了在毕赤酵母菌表达系统中的PoIFN-α基因的高效分泌表达。
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