【摘 要】
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探索OmpW在鸭源鸡杆菌耐药性形成中的作用.运用M-V培养基诱导鸭源鸡杆菌自然感受态细胞,用含有氯霉素抗性(Cmpr)筛选标记和同源臂的线性DNA打靶片段替换目的基因;以PCR、SDS-PAGE及Western-blot鉴定阳性转化子ΔompW.通过微量稀释法测定12种抗菌药物对鸭源鸡杆菌亲本菌株RU和突变株ΔompW的最小抑菌浓度(MIC).鸭源鸡杆菌阳性转化子缺失了OmpW,成功构建了OmpW
【机 构】
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河南农业大学禽病研究所,河南郑州450002 中国兽药监察所,北京100086
【出 处】
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第五届全国禽病分子生物技术青年工作者会议
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探索OmpW在鸭源鸡杆菌耐药性形成中的作用.运用M-V培养基诱导鸭源鸡杆菌自然感受态细胞,用含有氯霉素抗性(Cmpr)筛选标记和同源臂的线性DNA打靶片段替换目的基因;以PCR、SDS-PAGE及Western-blot鉴定阳性转化子ΔompW.通过微量稀释法测定12种抗菌药物对鸭源鸡杆菌亲本菌株RU和突变株ΔompW的最小抑菌浓度(MIC).鸭源鸡杆菌阳性转化子缺失了OmpW,成功构建了OmpW缺失突变菌株ΔompW;相对于RU,土霉素和四环素对ΔompW的MIC值分别降低到1/8(16/128,p＜0.01)和1/32(4/128,p＜0.01),其他药物的MIC值无明显变化.本研究首次利用自然转化法构建了鸭源鸡杆菌OmpW缺失菌株ΔompW;OmpW在鸭源鸡杆菌抗四环素类药物中发挥重要作用.
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