【摘 要】
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为筛选潜在的保护性抗原基因研制鸭源鸡杆菌(Gallibacteriumanatis,G.anatis)基因工程疫苗,参考GenBank中G.anatis UMN179的外膜蛋白A(Outer membrane protein A,OmpA)基因序列设计一对引物,对鸭源鸡杆菌PDS-RZ-1-SLG株的ompA基因进行克隆,并应用相关软件和程序对其核苷酸及氨基酸序列进行生物信息学分析.结果显示om2
【机 构】
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河南农业大学,禽病研究所,河南郑州450002
【出 处】
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第五届全国禽病分子生物技术青年工作者会议
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为筛选潜在的保护性抗原基因研制鸭源鸡杆菌(Gallibacteriumanatis,G.anatis)基因工程疫苗,参考GenBank中G.anatis UMN179的外膜蛋白A(Outer membrane protein A,OmpA)基因序列设计一对引物,对鸭源鸡杆菌PDS-RZ-1-SLG株的ompA基因进行克隆,并应用相关软件和程序对其核苷酸及氨基酸序列进行生物信息学分析.结果显示om2pA基因大小为1083bp,编码361个氨基酸;与鸭源鸡杆菌UMN179、F149及12656/12的OmpA氨基酸相似性分别为93.2％,95.2％,92.7％;OmpA分子质量为38.4kDa,等电点为6.77,是能够稳定存在的蛋白,N端有一个疏水性的α螺旋信号肽,C端有一个疏水性的β折叠区域,并且在外膜表面存在两个保守性的B细胞线性表位.本研究首次成功克隆了鸭源鸡杆菌PDS-RZ-1-SLG株的ompA基因,并对其结构与功能进行初步分析和预测,为进一步研究其生物学功能及其应用奠定基础.
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鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)属于黄病毒科、黄病毒属的病毒.许多黄病毒可经由不同途径或不同方式的抑制或逃避宿主抗病毒免疫系统.经体外实验发现DTMUV的结构蛋白(C、P和E)和部分非结构蛋白(NS1、NS2B、NS3、NS4A和NS5)能够抑制鸭免疫系统,而促进新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)在鸭胚成纤维细胞(DEFs)上的增殖
坦布苏病毒(Tembusu virus,TMUV)感染是危害我国水禽业的新发传染病,本研究旨在制备TMUV囊膜(enve-lope,E)蛋白的单克隆抗体.用原核表达系统表达E蛋白,用亲和层析的方法纯化蛋白,以纯化蛋白为免疫原免疫小鼠,收集小鼠脾细胞,与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,制备杂交瘤细胞.经筛选与亚克隆,获得2株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞.在免疫荧光试验中,获得的两株单克隆抗体表现
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