【摘 要】
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七鳃鳗是一种现存的最早的脊椎动物。通过对七鳃鳗的研究，我们可以对脊椎动物的早期进化特点有更好的理解。然而七鳃鳗的生活习性决定了传统的遗传学方法研究很难运用到七鳃鳗上面进行研究。在此，我们根据七鳃鳗的基因组信息构建了七鳃鳗密码子偏好性的CRISPR/Cas 系统对东北七鳃鳗(Lethenteron morii)进行敲除。结果显示，构建的七鳃鳗密码子偏好性的CRISPR/Cas 系统可以在七鳃鳗上面实
【机 构】
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上海海洋大学水产与生命学院,上海,201306
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七鳃鳗是一种现存的最早的脊椎动物。通过对七鳃鳗的研究，我们可以对脊椎动物的早期进化特点有更好的理解。然而七鳃鳗的生活习性决定了传统的遗传学方法研究很难运用到七鳃鳗上面进行研究。在此，我们根据七鳃鳗的基因组信息构建了七鳃鳗密码子偏好性的CRISPR/Cas 系统对东北七鳃鳗(Lethenteron morii)进行敲除。结果显示，构建的七鳃鳗密码子偏好性的CRISPR/Cas 系统可以在七鳃鳗上面实现高效率敲除，并且在早期胚胎中可以观测到对应基因的表型。据此，我们认为CRISPR/Cas9 技术为实现对那些不能进行人工繁育的物种的功能基因的研究奠定了基础。
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miR-202 是与细胞分化相关的let-7 家族成员,其序列和功能在脊椎动物物种间具有高度保守性。尽管有报道miR-202 与性腺的发育有关,miR-202 在斑马鱼胚胎发育过程中的调控功能尚未见报道。本研究利用前沿的CRISPR/Cas9 基因编辑技术系统对斑马鱼胚胎的miR-202 基因所在区域进行了片段敲除。结果显示miR-202 敲除的F1 代杂合子斑马鱼与野生型对照组斑马鱼胚胎发育过程
应用碳、氮稳定同位素技术对2014 年11 月至2015 年8 月所采集的长江口主要渔业生物进行了分析.对32 种鱼类,12 种无脊椎动物进行了研究,研究结果显示：鱼类的δ15N 值范围为9.26‰～15.45‰,跨度为6.19‰,δ13C 值范围为-29.78‰～-14.25‰,相差15.53‰,计算出相应的营养级范围为3.37～5.82,属于3 个营养级.无脊椎动物δ15N 范围为7.73‰～
冰冻海洋中生存的南极eelpout(Lycodichthys dearborni)体内能合成高浓度的Ⅲ型抗冻蛋白(AFP Ⅲ).为了寻找新的AFP Ⅲ基因,构建了L.dearborni肝脏cDNA文库.通过斑点杂交筛选此文库,发现一个287 kb的cDNA克隆 LD12.序列分析采用DNAssist 2.0和ClustalX 1.8软件.结果显示,LD12分子由12个串联重复的片段构成,每一个片段
为了研究低温胁迫下抗冻基因LD4 对细胞应激颗粒(stress granules)形成的影响，以便为鱼类耐寒育种提供理论依据.我们从南极鱼Lycodichthys dearborn(LD)的多聚AFPⅢ 基因LD12 CDNA 中克隆得到AFPⅢ 蛋白四聚体LD4.将其转染到HeLa 细胞中，通过反转录PCR(RT-PCR)、Western Blot 检测到目的基因LD4 在细胞中成功表达.进一步
cyclin B 作为细胞周期调控蛋白，与Cdc2 激酶结合形成成熟促进因子(MPF)，在动物卵母细胞减数分裂成熟过程中可诱导生发泡破裂(GVBD).为了探究虾蟹类卵母细胞减数分裂成熟机制，本研究克隆了罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)cyclinB 的 cDNA 全长，该基因编码398 个氨基酸多肽，分子量为45.16 kDa.利用western 印迹和免疫组化的方法
为了探究甲状腺激素调节牙鲆仔鱼变态发育的信号通路，本实验研究分析检测了甲状腺轴中的关键要素在牙鲆仔鱼变态过程中的表达和动态变化。采用实时荧光定量PCR 技术检测了3 个脱碘酶和3 个甲状腺素受体基因在牙鲆仔鱼变态过程中的表达情况，采用双抗夹心法酶联免疫吸附实验检测了牙鲆仔鱼在变态过程中体内2 种甲状腺激素T4 和T3 水平的变化。
为了研究卵泡刺激素受体(FSHR)在中华绒螯蟹中是否存在,对我们分离得到的FSHR 类似物进行分析,该基因全长2082bp,编码576aa.首先通过验证实验,发现FSHR 在中华绒螯蟹中有表达.不同组织的RT-PCR 证明FSHR 不仅在中华绒螯蟹的性腺中表达,而且在非性腺中也有表达.其中,在卵黄形成前期(pvt)的卵巢中表达量最高,其次鳃、心脏、脑、精巢,而胸神经团、眼柄、肌肉、肝胰腺中几乎没有
为了鉴定低温下斑马鱼响应基因的顺式作用元件，以便对鱼类低温下的调控网络有更深层次的认识。本实验将顺式作用元件(AGMAACCA 和SAGTCAA)和突变序列克隆到基于Tol2 转座子的EGFP 报告系统载体上，利用显微注射技术导入到斑马鱼受精卵中，鉴定顺式作用元件受温度调控的能力。结果显示，顺式作用元件AGMAACCA 在低温下能诱导EGFP 的表达；而顺式作用元件SAGTCAA 在低温下抑制EG
本研究利用RT-PCR 与RACE-PCR 方法克隆获得一个福寿螺(Pomacea canaliculata)CYP450基因cDNA,序列全长为2302bp,含一个1512 bp 的开放阅读框(ORF),可编码503 个氨基酸残基.该编码蛋白含有CYP4 家族成员的保守特征序列,螺旋K(E--R--P),氧结合结构区(AG--T),血红素结合区(PF--G---C-G--F)等保守区域.同源性分
梭鲈(Lucioperca lucioperca)是一种新的适合于池塘、网箱养殖的鱼,具有广阔的开发前景.为了解梭鲈对盐碱的耐受性,解决向内陆碳酸盐型盐碱水域移殖的关键问题,本文采用急性毒理学方法研究了盐度和碱度对梭鲈(5-6cm)96h 的半致死浓度和安全浓度.结果表明：盐度对梭鲈96h半致死盐度为20.4‰,安全盐度为6.12‰；碱度对梭鲈96h 的半致死浓度为40.93mmol/L,安全浓度