【摘 要】
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将人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)置于添加了一系列浓度丁酸钠(SB)的生长培养基和成骨诱导培养基中培养,通过MTT方法测定细胞增殖,采用流式细胞仪分析细胞周期和细胞凋亡,由茜素红染色观察钙结节形成,并定量测定Ca离子,进一步对比成骨诱导过程中丁酸钠的短暂刺激和长期刺激对羊膜间充质干细胞成骨分化的影响.结果表明,在生长培养基中丁酸钠对羊膜间充质干细胞增殖呈浓度依赖型的影响,培养至第4 d,添加了0
【机 构】
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华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237
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将人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)置于添加了一系列浓度丁酸钠(SB)的生长培养基和成骨诱导培养基中培养,通过MTT方法测定细胞增殖,采用流式细胞仪分析细胞周期和细胞凋亡,由茜素红染色观察钙结节形成,并定量测定Ca离子,进一步对比成骨诱导过程中丁酸钠的短暂刺激和长期刺激对羊膜间充质干细胞成骨分化的影响.结果表明,在生长培养基中丁酸钠对羊膜间充质干细胞增殖呈浓度依赖型的影响,培养至第4 d,添加了0.25 mM 、0.50 mM 、1.00 mM 丁酸钠的培养基中,细胞生长的抑制率分别为41.0％、61.6％和78.4％,G1/G0期细胞比例逐渐增加,S期细胞比例显著降低,且没有出现明显的凋亡.在成骨诱导过程中,与对照组相比,添加丁酸钠的实验组钙含量略有下降;而与丁酸钠长期刺激组相比,经短暂刺激后钙结节量显著上升.可见,较高浓度的丁酸钠持续刺激抑制羊膜间充质干细胞增殖和分化,而短暂刺激却有利于细胞向成骨分化.
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