离心超滤质谱法筛选二妙丸中黄嘌呤氧化酶抑制剂

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黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidaSe,EC 1.17.3.2)是一种黄素蛋白酶,存在于多种生物体中,可催化次黄嘌呤生成黄嘌呤,并进一步催化黄嘌呤氧化产生尿酸和超氧阴离子[1]。尿酸浓度过高会导致高尿酸血症,并且随着尿酸在关节处的沉积结晶可引起痛风发作。超氧阴离子则与细胞损伤、炎症、癌变和衰老相关[2,31。因此黄嘌呤氧化酶是治疗多种疾病尤其是高尿酸血症和痛风的关键靶点酶。二妙丸来源于《丹溪心法》一书,本方由黄柏、苍术两味中药1:1组成,具有清热燥湿之功效,适用于膝关节红肿热痛、腿膝疼痛、湿疮、带下等病症。现代研究发现二妙丸具有黄嘌呤氧化酶抑制作用,能够用于高尿酸血症和痛风的治疗[4]。我们采用离心超滤质谱分析技术(UF-UPLC/Q-TOF/MS),对中药复方二妙丸提取物中的黄嘌呤氧化酶抑制剂进行了筛选。实验步骤如下:(1)将二妙丸粉末进行超声提取得到二妙丸水提物;(2)运用离心超滤技术得到黄嘌呤氧化酶抑制成分;(3)运用超高效液相色谱-质谱分离分析二妙丸中黄嘌呤氧化酶抑制成分。实验结果如表1所示,从二妙丸提取物中筛选并鉴定出7种具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的化合物,为开发黄嘌呤氧化酶抑制剂及阐明二妙丸治疗痛风和高尿酸血症的机制提供了一定依据。
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