采用温度控制的重组大肠杆菌高效生产α-酮基丁酸

来源 :2016氨基酸产业技术应用与发展论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sunwen_fly
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α-酮基丁酸被广泛应用于医药和食品添加行业.由于化学法和酶法存在诸多不足,利用发酵法生产α-酮基丁酸及其下游相关产品受到越来越多的关注.本研究以L-苏氨酸高产菌E.coli THRD为出发菌株,首先构建了α-酮基丁酸基因工程菌THRDΔrhtA△ilvIH/pWSK29-ilvA,其摇瓶发酵产量可以达到16.25g/L.但同时发现目的产物α-酮基丁酸的积累会严重抑制宿主菌生长,干扰大肠杆菌的正常代谢.为了进一步提高产量及避免化学诱导剂的使用,利用温度诱导型启动子控制苏氨酸脱水酶表达,通过变温控制进行α-酮基丁酸发酵.前期培养温度为35℃,以保证细胞正常生长,然后升高温度至40℃诱导苏氨酸脱水酶表达.最优条件下,发酵28h,α-酮基丁酸产量达40.82g/L,单位产酸速率1.46g/L/h,糖酸转化率18.75%,具备了工业化生产潜力.
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