【摘 要】
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目的 检测急性B系白血病细胞系中Aiolos基因表达,利用RNA干扰(RNAi)技术,研究aiolos基因在白血病发生发展中对白血病细胞周期,增殖及凋亡的影响,为以aiolos为靶点治疗白血病提供理论依据.方法 westem blot检测Ball-1,Jurkat,K562,Nalm-6,Sapt-1五种不同白血病细胞系中aiolos的表达.针对aiolos基因的不同部位设计短发夹RNA (shR
【机 构】
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山东大学齐鲁医院,山东 济南 250012
【出 处】
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庆祝中国当代儿科杂志创刊15周年大会暨当代儿科论坛
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目的 检测急性B系白血病细胞系中Aiolos基因表达,利用RNA干扰(RNAi)技术,研究aiolos基因在白血病发生发展中对白血病细胞周期,增殖及凋亡的影响,为以aiolos为靶点治疗白血病提供理论依据.方法 westem blot检测Ball-1,Jurkat,K562,Nalm-6,Sapt-1五种不同白血病细胞系中aiolos的表达.针对aiolos基因的不同部位设计短发夹RNA (shRNA)的寡核苷酸片段,western blot蛋白定量方法在293细胞中筛选抑制效率最高的shRNA干扰片段,构建靶向aiolos 基因的慢病毒载体,并将其转染至白血病细胞系Nalm-6,7d后检测结果.westem blot检测转染后对aiolos表达蛋白的抑制作用,用MTT检测沉默aiolos基因后对白血病细胞系增殖,流式细胞仪检测其对细胞周期及凋亡的影响.结果 aiolos在Ball-1,Jurkat,K562,Nalm-6,Sapt-1细胞系中均有表达,siRNA转染白血病细胞系细胞后,westem blot结果显示aiolos表达蛋白定量较未转染组和无关对照组的表达量在36小时有明显下调.靶向aiolos基因的慢病毒载体转染Nalm-6细胞7d,MTT检测细胞生长活跃,增殖能力增强,周期缩短,凋亡受抑制.结论 aiolos在Ball-1,Jurkat,K562,Nalm-6,Sapt-1细胞系中均有表达,Aiolos靶向的shRNA能够下调其表达,并能促进细胞增殖,缩短细胞周期,抑制细胞凋亡,为以aiolos作为靶点基因治疗白血病提供了理论依据.
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