【摘 要】
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目的 已有研究证实一氧化氮(NO)可通过多种途径抑制血管再狭窄的形成,而中药加味补阳还五汤是否有保护血管损伤后内膜的修复,尚不十分清楚,本研究观察了中药加味补阳还五汤对兔髂动脉球囊损伤后内膜的保护作用以及对NO途径的影响.方法 24只新西兰兔随机分成假手术组、模型组、加味补阳还五汤组(治疗组),每组8只.实验前2周,假手术组动物普通饲料饮食,模型组及治疗组均予高脂饮食.2周后治疗组加用补阳还五汤药
【机 构】
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中山大学附属第三医院心血管内科,广州,510630;中山大学心血管研究所,广州,510630 中山
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目的 已有研究证实一氧化氮(NO)可通过多种途径抑制血管再狭窄的形成,而中药加味补阳还五汤是否有保护血管损伤后内膜的修复,尚不十分清楚,本研究观察了中药加味补阳还五汤对兔髂动脉球囊损伤后内膜的保护作用以及对NO途径的影响.方法 24只新西兰兔随机分成假手术组、模型组、加味补阳还五汤组(治疗组),每组8只.实验前2周,假手术组动物普通饲料饮食,模型组及治疗组均予高脂饮食.2周后治疗组加用补阳还五汤药颗粒剂(2ml· kg-1·d-1)(含生药5 g/ml),实验方剂为王清任方加味,方药为黄芪、当归、川芎、赤芍、桃仁、红花、地龙、生山楂和三七.假手术组及模型组喂食同前.观察4周后处死动物,检测血清总NOS活性,并用RT-PCR检测血管eNOS mRNA的表达,通过免疫组化检查血管eNOS蛋白的表达.取部分髂动脉通过透射电镜观察髂动脉的超微结构的变化.结果 透射电镜发现:对照组兔髂动脉血管壁结构层次清晰,内皮完整,无泡沫细胞；模型组可见内皮细胞脱落,大量泡沫细胞,平滑肌细胞游走；加味补阳还五汤组内皮细胞基本正常,泡沫细胞较少.模型组血清总NOS活性(40.45U/ml±32.02U/ml)明显低于假手术组(135.40U/ml±11.21U/ml)和治疗组(102.56 U/ml±53.23U/ml)(P＜0.05);通过图像分析系统对免疫组化染色结果进行处理:发现模型组eNOS染色阳性面积比(0.005±0.003)明显小于假手术组(0.03±0.02)和治疗组(0.0166±0.007)(P＜0.05),而治疗组eNOS染色阳性面积比小于假手术组,模型组的eNOS染色灰度(111.46±10.32)明显小于假手术组(128.68±5.26)和治疗(124.60±10.70)(P＜0.05),而后两组无显著性差异.通过图像分析系统对RT-PCR结果进行处理:以eNOS DNA扩增产物的灰度与参照物β-actin(eNOS/β-actin)灰度的比值反映eNOS mRNA表达的情况,发现模型组eNOS/β-actin灰度比值(0.15±0.06)明显小于假手术组(0.35±0.07)和治疗组(0.27±0.05)(P＜0.05),而治疗组明显小于假手术组.结论 加味补阳还五汤能促进兔髂动脉球囊损伤后内膜的修复,其作用机制可能与增加eNOS基因和蛋白的表达,从而促进NO的产生有关.
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