积雪草酸通过线粒体途径选择性诱导活化T细胞凋亡从而治疗免疫性损伤

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目的:寻找可选择性诱导活化T细胞凋亡的中药来源的小分子化合物。方法:采用Annexin V/PI染色法检测T细胞凋亡;采用Western blot法考察细胞凋亡相关分子PARP,caspase-9,caspase-3,caspase-7及caspase-8的活化;JC-1染色考察线粒体膜电位的变化;采用Con A尾静脉注射造成小鼠免疫性肝损伤;采用ELISA法检测血清中炎症因子水平;H&E染色检测肝组织形态学变化;TUNEL法检澳肝组织中浸润CD4~+T细胞的凋亡。结果:体外实验表明:10,20,40μM的积雪草酸可显著诱导活化的T细胞发生线粒体途径介导的细胞凋亡,主要表现为线粒体膜电位显著下降、细胞色素c从线粒体释放到胞浆、caspase-9/-3及PARP的大量活化。积雪草酸处理对于内质网及死亡受体介导的细胞凋亡通路无明显影响。与此同时积雪草酸处理不影响非活化T细胞的凋亡。体内实验表明:灌胃给予Con A处理过的小鼠15,30,60 mg/kg的积雪草酸可显著抑制肝损伤,主要表现为血清中ALT、AST及炎症因子TNF-α、IFN-γ水平的显著下降、肝组织形态学的明显改善。进一步发现,积雪草酸给药可明显诱导肝组织中浸润的CD4~+T细胞发生凋亡。结论:本研究表明积雪草酸可通过诱导活化T细胞发生线粒体依赖的凋亡进而改善小鼠免疫性肝损伤。
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