CRISPR/Cas9介导的轮枝镰刀菌基因编辑系统的构建

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轮枝镰刀菌(Fusarium verticillioides)是甘蔗梢腐病(Pokkah boeng disease,PBD),最主要的病原菌之一,但是目前对其致病力相关基因的研究极少。为了高效率地研究轮枝镰刀菌的致病力相关基因,我们选择丝状真菌密码子优化的Cas9和稻瘟病菌(Pyricularia oryzae)的内源RNA聚合酶IIIU6启动子,将Cas9表达盒和sgRNA表达盒放在同一个载体上,构建了CRISPR/Cas9介导的轮枝镰刀菌基因编辑系统。研究结果表明,该系统可以识别目标序列并靶向进行基因置换,其介导同源重组的敲除效率为48%,而单一同源重组的基因敲除效率仅为26%。该基因编辑系统的建立为轮枝镰刀菌的基因功能研究奠定了基础。
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