第一部分 大鼠原代皮层神经元锰离子增强磁共振功能成像 目的 要进行NSCs移植分化神经元的MEMRI功能评估,需要了解神经元的锰吸收能力、锰离子成像特性及锰离子对神经元存活的影响.方法 原代皮层神经元培养及鉴定.原代培养的皮层神经元分为无锰干预对照组及MnCl2干预组.MnCl2干预组又按添加MnCl2终浓度不同分为各浓度亚组；无锰干预对照组则不添加MnCl2.添加MnCl2后24小时进行MTT检测.另设与以上相同组在添加MnCl2后,进行谷氨酸刺激,其中0.5mM MnCl2干预亚组设1个不进行谷氨酸刺激的对照,24小时后以电感耦合等立体体质谱法检测细胞内的锰含量,及进行细胞磁共振成像实验.结果 MnCl2标记组神经元存活量均低于对照组；0.1mM浓度以下MnCl2标记组存活率较高.随着标记锰浓度的增高,神经元内锰含量也增高,加谷氨酸刺激组细胞内锰含量高于无谷氨酸刺激组.0.1mM浓度以上MnCl2标记组的磁共振信号强度有明显增高,MnCl2标记组信号强度高于无谷氨酸刺激组.结论 及意义 1、建立了MEMR体外培养细胞功能成像的技术方法.2、为下步MEMR成像NSCs移植后神经元功能评估提供了前期研究基础.实验中应用106/ml神经元进行成像实验,需0.1mM MnCl2才可获得较明显的磁共振增强效果,而该浓度MnCl2会对神经元造成一定损伤作用.由此提示,进行NSCs移植功能追踪实验时,移植细胞在体内浓度应高于106/ml.根据本实验室前期的细胞移植实验工作,在鼠脑局部损伤区移植NSCs数量只要能达到105以上、或其他途径移植时但局部浓度能够达到并超过106/ml,也就可能达到成像需求,在移植细胞数量方面一定程度上证明了应用MEMRI功能成像移植NSCs分化神经元的可行性.3、为下步进行NSCs分化神经元功能评估提供了锰用量上的依据(建议组织锰浓度应低于0.05mMol/L).