【摘 要】
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将携带口蹄疫病毒VP1基因的原核表达质粒pETTrxVP1转化入表达菌BL21(DE3),经IPTG诱导,成功实现VP1基因的高效表达.表达的蛋白主要以包涵体形式存在,表达量超过沉淀总蛋白量的
【机 构】
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军事医学科学院军事兽医研究所(长春)
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将携带口蹄疫病毒VP1基因的原核表达质粒pETTrxVP1转化入表达菌BL21(DE3),经IPTG诱导,成功实现VP1基因的高效表达.表达的蛋白主要以包涵体形式存在,表达量超过沉淀总蛋白量的20﹪.采用多步洗涤、切胶纯化等方法对表达的蛋白进行了初步纯化,纯化率达85.4﹪,产量为4mg/L.同时采用改良过碘酸法制备了HRP酶标记兔抗牛IgG,确定其工作浓度为1:800.最后,利用纯化的重组蛋白和酶标二抗,建立了检测牛体内口蹄疫病毒抗体的间接ELISA检测方法,并用于口蹄疫基因工程疫苗效果的评价.
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