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目的:R-脊椎蛋白1(R-spondin1,Rspo1)可能通过Wnt/β-catenin信号通路促进左心室的重塑和心脏功能的改善。体外培养高表达Rspo1的骨髓充质干细胞(BMSCs)的信号机制的修饰可能会提高心肌梗死(MI)的细胞治疗的效果。该研究旨在评价高表达Rspo1的骨髓间充质干细胞是否通过WNT/β-catenin信号通路被诱导成心肌样细胞和该心肌样细胞移植入大鼠心肌梗死模型后对心肌梗死大鼠的心脏功能的改善。方法:1、编码Rspo1的腺病毒转染骨髓间充质干细胞,转染48 h后,流式检测腺病毒的转染效率,并且用Western blot和qP CR分别在基因和蛋白水平检测Rspo1的表达量;2、转染后加入5-氮杂胞苷(5-AZA)诱导其向心肌样细胞分化,并在基因和蛋白水平检测心肌特异性标志物α-actin、c Tn I和Cx43的表达量,并且检测Wnt/β-catenin信号通路的关键信号分子JNK,β-catenin和TCF的表达量;3、在转染后的细胞中加入Wnt/β-catenin信号通路的抑制剂LGK-974,检测该信号通路的关键信号分子JNK,β-catenin和TCF的表达情况,并检测心肌特异性标志物的表达情况。4、把大鼠分成三组:Control组、Negative组、Overexpression组,用心脏超声分别检测心梗后3天、2周、4周大鼠的心脏功能,免疫组化检测毛细血管的生成情况,Masson染色观察心脏组织的大体形态。结果:1、流式检测Overexpression组和Negative组病毒的转染率均比Control组高,Western blot和qP CR结果显示Rspo1在Overexpression组比Control组和Negative组的表达增高,而Control组和Negative组之间无明显差异;2、诱导后在基因和蛋白质水平检测心肌特异性标志物α-actin、c Tn I和Cx43的表达和通路的关键信号分子JNK、β-catenin和TCF的表达,Overexpression组比Control组和Negative组均高,而Control组和Negative组无明显差异;3、加入Wnt/β-catenin信号通路的抑制剂LGK-974后,qP CR检测JNK、β-catenin和TCF,加入抑制剂的Overexpression组低于Overexpression组,而加入抑制剂的Overexpression组与Control组无明显差异,而用Western blot和qP CR分别检测心肌标志物α-actin、c Tn I、Cx43,结果显示加入抑制剂的Overexpression组低于Overexpression组,而与Control组无明显差异;4、心脏超声显示Overexpression组大鼠心脏功能明显改善,并且促进了毛细血管的再生。结论:Rspo1可通过Wnt/β-catenin信号通路促进骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化,从而改善大鼠心脏心梗后心脏功能,为深入研究心肌梗死的细胞治疗奠定了基础。