【摘 要】
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目的:建立一套等位基因特异性扩增(ASA)的检测体系,用于结核分枝杆菌对利福平耐药性的快速检测.方法:根据结核分枝杆菌野生型基因设计ASA特异性引物,ASA PCR扩增39株结核杆菌利福平耐药株的rpoB基因,琼脂糖凝胶电泳加以检测,进而推断其利福平的耐药性;同时进行DNA序列测定以证实ASA法的检测结果,并分析上海地区结核杆菌rpoB基因的突变特点.结果:ASA法一共检出了39株利福平耐药株中的
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目的:建立一套等位基因特异性扩增(ASA)的检测体系,用于结核分枝杆菌对利福平耐药性的快速检测.方法:根据结核分枝杆菌野生型基因设计ASA特异性引物,ASA PCR扩增39株结核杆菌利福平耐药株的rpoB基因,琼脂糖凝胶电泳加以检测,进而推断其利福平的耐药性;同时进行DNA序列测定以证实ASA法的检测结果,并分析上海地区结核杆菌rpoB基因的突变特点.结果:ASA法一共检出了39株利福平耐药株中的36株,敏感性为92.3％;DNA测序结果发现二者间的符合率为87.2％,并鉴定了11种不同类型的41种突变形式,其中包括9种点突变和2种基因缺失.结论:用等位基因特异性扩增法来分析结核分枝杆菌的rpoB基因突变具有较高的特异性与敏感性,该法快速、简便、可靠,可应用于临床利福平耐药性的检测.
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