【摘 要】
：
多药耐性相关蛋白MRP2(ABCC2)广泛分布于哺乳动物的小肠、肝和肾，并专一性地定位于极性细胞的顶侧膜上。为了探讨radiXin和CZrill蛋白对人小肠中MRP2顶侧膜定位的影响，运用RNA干扰技术构建了稳定的radiXin、ezrin缺损的CaCO-2细胞；使用该细胞系进行细胞表面生物素标记实验，发现radiXin、CZrill的缺失导致了细胞表面MRP2的减少。免疫染色实验表明，radix
【机 构】
：
日本东京大学药学部，药物动态学教研室，东京文京区本(乡郎)，1130033 复旦大学药学院，上海市
【出 处】
：
沪、苏、闽暨全军生物技术药物研讨会
论文部分内容阅读
多药耐性相关蛋白MRP2(ABCC2)广泛分布于哺乳动物的小肠、肝和肾，并专一性地定位于极性细胞的顶侧膜上。为了探讨radiXin和CZrill蛋白对人小肠中MRP2顶侧膜定位的影响，运用RNA干扰技术构建了稳定的radiXin、ezrin缺损的CaCO-2细胞；使用该细胞系进行细胞表面生物素标记实验，发现radiXin、CZrill的缺失导致了细胞表面MRP2的减少。免疫染色实验表明，radixin、CZFin定位于Caco-2细胞的顶侧膜；免疫沉淀实验表明，CaCO-2细胞中MRP2与radixin、CZrin结合在一起。这些结果说明在Caco-2细胞中radi Xin、CZrill均被MRP2的顶侧膜定位机制所需要。radixin，OZrin在MRP2顶侧膜定位机制中起相似的作用，它们的表达水平及细胞下分布是在翻译后水平调控MRP2的重要因素。
其他文献
研究卵泡刺激素受体 (follicle sLimulating H0rmoncreccptor，FSHR)作为男性免疫避孕疫苗的可能性。利用分子生物学方法克隆表达卵泡刺激素受体FSHR，以此作为免疫原免疫雄性冠毛猕猴，观察免疫应答反应及其对精子生成的影响。结果表明，在噬菌体中表达出FSHR 蛋白多肽，免疫成年雄性冠毛猕猴产生较强的免疫应答，血清抗体效价达到1：l000，免疫后的雄性猕猴在疫苗加强注
本论文研究了细菌素产生菌Bacillus subtilisis FBl23所产细菌素的理化性质及其抑菌谱。B.subtjlis FBl23经过28C、32小时的发酵得到发酵上清液，用饱和度为50％的硫酸铵溶液沉淀发酵上清液中的细菌素。以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为指示菌，采用牛津杯法对细菌素粗品进行理化性质的研究，结果表明该细菌素最适作用pH 为6.0，最适作用温度40℃，具有较广的pH作用范围和较
目的：探讨FSH受体胞外多肽抗原作为女性生殖调节疫苗的可能性。方法：利用分子生物学技术克隆和表达卵泡刺激素受体(FSHR)胞外片段多肽蛋白，重组噬菌体表达FsHR胞外区A18 27，B25 34和C29 38三种多肽片段。将其作为抗原免疫Balb/c雌性小鼠，观察小鼠免疫应答，用表达FsHR的CHO细胞膜蛋白与”、I-FSH竞争结合实验测定抗体亲和力，观察小鼠生育力的变化。结果：重组噬菌体表达FS
经筛选得到一株高产核糖核酸(RNA)的热带假丝酵母(Candiatropicalis)TOD-0605，通过优化该茼株产核酸的培养条件，将其摇瓶产核酸水平从8％提高至16％，并通过优化发酵罐参数使菌体湿重达到80g/l。
为了得到能高效表达较高活性的核苷磷酸化酶的重组大肠杆菌，我们尝试选择pET-11a-d和BL21(DE3)来对核苷磷酸化酶基因进行克隆和表达。通过蛋白分析和活性测定以及与野生茼活性的比较，重组蛋白的表达量占到了总蛋白的50％，其活性也较高。因此，构建的工程菌可以用来高效表达具有较好活性的核苷磷酸化酶。
光动力疗法是一种正在研究发展中的治疗肿瘤、视网膜黄斑变性、光化性角化病、类风湿性关节炎等疾病的新型疗法。本文重点介绍了已经上市的六种光动力药物卟吩姆钠、维替泊芬、5-氨基酮戊酸、5-氨基酮戊酸甲酯、替莫泊芬、他拉泊芬，并对目前国内外正在进行研究开发的一些主要的光动力治疗药物的药理、代谢、临床应用和适应症等性质进行了归纳总结。我们相信，在不久的将来，光动力治疗必将成为人类征服疾病的强有力工具。
目的：应用纯化的人重组TNF-a作为抗原从噬菌体抗体库中筛选针对人重组TNF-a的人源性单链抗体(scFv)。方法：用固相化的人重组TNF-a作为抗原对噬菌体抗体库进行四轮“吸附-洗脱-扩增”的筛选，从第四轮洗脱下来的噬菌体中挑选针对人TNF-a特异性强、亲和力高的scFv，并进行基因序列分析。结果：所获氨基酸序列与抗体胚系基因数据库(V-BASE)比较，发现其重、轻链可变区分别属于VH5型、VL
本研究利用RNA干扰的方法沉默树突状细胞中具有负向调节作用的分子B7-H1基因的表达，研究了它对Dc疫苗抗病毒效果的影响。结果显示，B7-H1特异性的siRNA负载HBV表面抗原的优势表位肽后可诱导更强的CTL活性，HBV转基因小鼠血清中的HBsAg和HBV DNA的含量均比对照组低，表明B7-H1基因的沉默可增强Dc疫苗抗病毒的效果。
本文总结了近年来上市、临床试验和临床前研究的天然活性多肽，并简述了天然活性多肽的药理作用。对天然活性多肽药物的研究应用具有一定的参考价值。
目的：通过对人胸腺素a原cDNA测序来分析胸腺素a原的序列多态性。方法：利用RT—PcR技术从外周血及脐带血中扩增胸腺素原cDNA，纯化后与克隆载体DMDl8一T连接，经克隆测序，通过与标准序列比对，测定其多态性。结果：序列分析结果表明，克隆的ProTa基因的核苷酸序列并不一致。与已报道的胸腺素a原基因进行比较，发现存在两种变异。(1)107位单核苷酸变异，以及11O一121位和191-205位的