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ERBB2作为一个重要的肿瘤表面标记蛋白已被国际公认为重要的临床指标。ERBB2的过表达与多种肿瘤的发生有关，且与治疗抗性和不良预后密切相关。应用特异性单抗检测肿瘤组织中ERBB2的过表达情况，能够有效地判断病人的预后，帮助选择合理的治疗方案。 本课题采用ERBB2融合蛋白免疫Balb/c小鼠，选取抗血清效价高的小鼠，将其脾细胞与SP2/0进行细胞融合。以有限稀释法进行克隆化培养，ELISA筛选阳性杂交瘤，最终获得数株来自不同亲本、稳定分泌特异性ERBB2单克隆抗体的杂交瘤细胞株。将这几株杂交瘤生产腹水抗体并经Protein G层析柱亲和纯化后，对所得单抗进行抗体效价测定、抗体亚型鉴定，同时辅以蛋白质印迹、免疫沉淀、细胞免疫荧光、免疫组化等实验验证抗体的特异性、亲和力与应用范围;另外，通过MTT方法筛选出能够抑制过表达ERBB2的乳腺癌细胞生长的抗ERBB2单克隆抗体。 本次单抗制备获得若干株纯度高、效价好、特异性强的抗ERBB2单克隆抗体，抗体效价均在6×105以上。它们均能特异地识别过表达ERBB2蛋白和SK-BR-3、BT474细胞中的内源ERBB2蛋白，为深入研究ERBB2蛋白在不同肿瘤细胞中的表达以及不同细胞系之间与ERBB2有关的信号转导途径，和进一步阐明抗ERBB2单克隆抗体抑制肿瘤的作用机制等提供了有力的研究工具。这些单抗均能应用于免疫沉淀、免疫荧光、免疫组化等实验，为研制临床诊断ELISA试剂盒和免疫组化试剂盒提供了思路，可以帮助判断乳腺癌病人的预后以及指导选择合理的治疗方案。其中的2株抗ERBB2单抗在体外实验中表现出抑制过表达ERBB2蛋白的乳腺癌细胞BT474的生长，可用作人源化改造，为进一步研发针对该靶点的抗体药物奠定了基础。