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前言 顺铂(Cis-diamminedichloroplatinum,CDDP)是当前临床上应用较广泛的一种肿瘤化疗药物。目前在美国和加拿大推荐的癌症治疗药物中,CDDP在头颈部癌、睾丸癌、卵巢癌等18种癌症中被推荐为首选药物,在其他许多癌症治疗中还作为二线药物。在我国的多种癌症治疗中,CDDP也作为首选药物。CDDP虽然是一种有效的肿瘤化疗药物,但其毒副作用,如耳毒性、骨髓毒性、肝毒性和肾毒性等,特别是肾毒性也是十分严重的。深入探讨CDDP肾毒性的机理以及寻求有效的化学防护剂一直是CDDP毒理学研究的热点。CDDP所致肾毒性的确切机理迄今尚不清楚,但大量最新实验研究表明, CDDP可诱导氧化应激;CDDP可与DNA碱基的氮原子形成稳定的Pt-DNA加合物,其中链内交联是Pt-DNA加合物的主要形式。姜黄素(Curcumin,CMN)是中药姜黄(Curcumalonga L.)中的酚类色素成分,具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎等广泛的药理作用,而且毒性很低。CMN能有效抑制实验动物皮肤癌、胃癌、肠癌及乳腺癌的生长。近年来报道, CMN能诱导体外培养的MGC803、Bel7402、Bf16、K562/ADM等肿瘤细胞凋亡。有关研究表明,CMN是铁催化的磷脂过氧化反应的抑制剂,能抑制铁催化的大鼠肝微粒体的脂质过氧化反应,而且其抗氧化作用比α-生育酚还强。另外,CMN可抑制 DNA加合物的形成,使加合物的含量下降,从而保护DNA等细胞大分子。 <WP=5>本实验通过体内和体外实验,试图从氧化应激及DNA损伤两方面探讨CDDP的肾毒性机理,并以CMN为干预物,研究其对CDDP肾毒性的防护效果,为其应用于临床,从而提高化疗效果提供实验依据。方法 体内实验,以成年健康雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠为研究对象,将大鼠按体重随机分为六组,每组7只。各组及其处理如下:(1)对照组:连续三天灌胃(ig)与CMN组等容量生理盐水(NS),第二次ig后1h一次腹腔注射(ip)与CDDP组等容量NS;(2)CMN组:连续三天ig CMN 80mg/kg,第二次ig后1h一次ip与CDDP组等容量NS; (3)CDDP组:连续三天ig与CMN组等容量NS,第二次ig后1h一次ip 5.5mg/kg CDDP;(4)CDDP+CMN低剂量组:连续三天ig 20mg/kg CMN,第二次ig后1h一次ip 5.5mg/kg CDDP;(5) CDDP+ CMN中剂量组:CMN剂量40mg/kg,其处理同(4)组;(6) CDDP+ CMN高剂量组:CMN剂量80mg/kg,其处理同(4)组。大鼠于给药后第1、3、5天称体重,乙醚麻醉后下眼眶内眦静脉采血,并于第5天采血后处死动物。观察指标包括:体重变化,肾脏系数,血清尿素氮(BUN)和肌酐(SCr),血清和肾皮质脂质过氧化产物丙二醛(MDA),以及肾皮质还原型谷胱甘肽(GSH)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、肾皮质铂(Pt)含量,肾组织形态学观察。体外实验,采用荧光法研究CDDP对LLC-PK1细胞DNA交联的情况,并观察CMN的干预的影响;采用MTT比色法研究CMN对CDDP体外抑制肿瘤细胞SCaBER、HO-8910PM生长的影响。结果 CDDP 5.5 mg/kg ip后第3、5天可引起明显的肾脏毒性。表现为体重降低,BUN和SCr水平升高;第5天,肾脏系数升高,血清和肾组织匀浆MDA水平升高,肾组织匀浆GSH含量和GSH-Px活性下降,与对照组比较,统计学分析有显著性差异(P<0.05),肾皮质Pt含量增高,组织形态学观察可见肾毒性急性肾小管损害表现。CMN预处理可抑制给予CDDP后第3、5天出现的上述毒性表现,尤其第5天预防作用显著,表明CMN的预处理能预防CDDP所致急性肾损害和肾功能下降,但CMN低剂量组的防护效果比中、高剂量组要好。体外实验,CMN能降低CDDP对<WP=6>LLC-PK1细胞引起的DNA交联作用,并呈剂量依赖性。另外,CMN对CDDP体外抑制肿瘤细胞SCaBER或HO-8910PM细胞增殖没有明显影响。结论 经口给予CMN可明显预防CDDP所致的肾毒性。CDDP肾毒性机理可能与氧化应激、DNA交联及肾组织中Pt的蓄积有关。CMN预防CDDP肾毒性机理可能与CMN的抗氧化和清除自由基活性有关。CMN对CDDP所致细胞毒性的防护作用可能与CMN降低CDDP所致DNA交联,减轻DNA损伤有关。CMN预防CDDP肾毒性机理可能与减轻肾组织中Pt的蓄积无关。CMN对CDDP的体外抗增殖活性无明显影响。综上所述,CMN是一种安全、低毒,并且具有抗癌、抗氧化等多种药理活性的药物。本实验研究为扩大CMN临床应用领域及寻求CDDP肾毒性的有效防护剂提供理论和实验依据