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目的1.研究原发性肝癌中Cks1和Cks2mRNA的表达水平。2.研究原发性肝癌中Cks1和Cks2蛋白的表达水平。3.探讨Cks1和Cks2的表达与原发性肝癌各个临床病理指标的关系。4.探讨Cks1/Cks2与p27kip1在原发性肝癌中表达间的关系。方法1.采用实时荧光定量PCR相对定量法检测原发性肝癌中Cks1、Cks2与p27kip1mRNA的表达水平。2.采用免疫组化法检测原发性肝癌中Cks1、Cks2与p27kip1蛋白的表达水平。结果1.成功建立了实时荧光定量PCR相对定量法检测Cks1和Cks2的mRNA表达水平,扩增效率分别为98.43%和95.22%,特异性好,重复性高(CV均低于3%)。2.Cks1和Cks2在原发性肝癌组织中mRNA和蛋白的表达水平均明显高于癌旁组织(肝炎组和肝硬化组)和正常肝组织组,统计有显著性差异(P<0.05);而癌旁组织与正常肝组织组无显著性差异(P>0.05)。p27kip1mRNA的表达水平在癌组和癌旁组织(肝炎组和肝硬化组)中无明显差异(P>0.05);但是蛋白表达水平在癌组织中明显低于癌旁组织(肝炎组和肝硬化组)(P<0.05)。3.Cks1mRNA的表达与原发性肝癌的病理分级、癌栓形成、肿瘤结节个数和AFP相关(P<0.05),而与患者的性别、年龄、淋巴结转移、肿瘤大小和HBV无关(P>0.05);Cks1蛋白的表达与原发性肝癌的病理分级、淋巴结转移和肿瘤结节个数和AFP相关(P<0.05),而与患者的性别、年龄、癌栓形成、肿瘤大小和HBV无关(P>0.05)。Cks2mRNA的表达与患者的年龄、病理分级和AFP相关(P<0.05),而与患者的性别、淋巴结转移、癌栓形成、肿瘤大小、结节个数和HBV无关(P>0.05);Cks2蛋白的表达与原发性肝癌的病理分级、淋巴结转移相关(P<0.05),而与患者的性别、年龄、癌栓形成、结节个数、肿瘤大小、HBV和AFP无关(P>0.05)。4.p27kip1蛋白的表达与Cks1蛋白(r=-0.412,P=0.006)和Cks2蛋白(r=-0.480,P=0.001)的表达水平均呈负相关。结论1.实时荧光定量PCR法检测Cks1和Cks2的mRNA表达水平具有快速、特异、稳定和准确等特点,为检测临床组织Cks1和Cks2基因的表达水平提供了有效的检测手段。2.原发性肝癌中Cks1和Cks2 mRNA和蛋白水平均有高表达,且与肿瘤的恶性程度相关,可能参与原发性肝癌的发生发展。3.原发性肝癌中Cks1和Cks2参与原发性肝癌的发生发展可能与p27kip1蛋白有关,其机理有待于进一步研究。