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目的：构建模拟小鼠IL-18天然生成的真核表达载体体系。 方法：用RT-PCR方法从小鼠脾细胞的总RNA中扩增出编码小鼠IL-18前体(mpro-IL-18)的基因，克隆至T载体pCR4-TOPO后，再定向克隆至真核表达载体pVR1012，构建成小鼠IL-18前体真核表达载体质粒pVR1012-mpro-IL-18；将小鼠IL-1β转换酶mICE的基因从克隆载体亚克隆至真核表达载体pEGFP-N1，构建成小鼠IL-1β转换酶真核表达载体质粒pEGFP-N1-mICE。将pVR1012-mpro-IL-18和pEGFP-N1-mICE单独或共同转染COS-7细胞，用RT-PCR法检测两载体的mRNA表达；用免疫印迹法检测转染细胞中IL-18蛋白的表达；用ELISA法检测转染细胞培养上清中IL-18的分泌；用~3H-TdR掺入法检测转染细胞培养上清中IL-18与IL-2共同作用的小鼠脾细胞增殖。将pVR1012-mpro-IL-18、pEGFP-N1-mICE和pVR1012-hIL-2三种真核表达载体质粒联合肌肉注射健康小鼠，用JAM-TAST法检测该小鼠脾细胞CTL杀伤同基因型肿瘤细胞的能力。 结果：正确构建了小鼠IL-18前体及小鼠IL-1β转换酶两种真核表达载体质粒，分别转染COS-7细胞后能检测到相应mRNA的表达。在pVR1012-mpro-IL-18单 中文摘要独gb pVR1012－mpro－IL刁 和 pEGFP－NlmlCE共转染的COSj细胞中能检测到前体和成熟两种不同形式的 ILIS蛋白表达，并且 IL刁 8能分泌到上清中；所分泌的 IL刁与IL上联合作用可增强小鼠脾细胞增殖能力。pVR1012－mpro－IL－18、pEGFP－NlmICE禾 pVR1012－hIL－2三种真核表达载体质粒联合肌肉注射健康小鼠，显著提高了其脾细胞 C TL杀伤同基因型肿 瘤细胞 白 自力。 结论：构建了模拟小鼠 IL刁 8天然主成的真核表达载体体系，该体系与 几二真核表达载体质粒共转染有可能用于肿瘤的基囚治疗。