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目的:检测慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B,CHB)患者外周血可溶性程序性死亡因子(sPD-1)/可溶性程序性死亡因子配体-1(sPD-L1)水平,了解抗乙肝病毒治疗对CHB患者外周血sPD-1/sPD-L1表达水平的影响,分析sPD-1/sPD-L1与ALT、AST、HBV DNA水平间的相关性,探讨sPD-1/sPD-L1水平与CHB患者外周血T淋巴细胞亚群间的关系。方法:选择97例初次接受恩替卡韦分散片(文中简称恩替卡韦,Entecavir,ETV)治疗的CHB患者为观察随访对象,将随访24周的51例CHB患者为实验组,20例同期健康体检者及20例HBV携带者为对照组。采集CHB患者治疗前、治疗第4周、12周、24周时外周静脉血标本,采用酶联免疫吸附测定法检测各观察时点的sPD-1/sPD-L1水平,采用实时荧光定量PCR法检测HBV-DNA载量,采用化学发光法检测乙肝病毒感染标志物,采用全自动生化分析仪检测肝功能指标。20例同期健康体检者及20例HBV携带者外周血sPD-1/sPD-L1水平检测方法与CHB患者检测方法相同。结果:1.ETV抗乙肝病毒治疗第4周时治疗组患者ALT、AST、TBIL水平及HBV DNA载量较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);CHB患者在治疗12周时ALT、AST、TBIL及HBV DNA载量持续降低,较治疗前比较差异有统计学意义(P<0.01);治疗24周时51例CHB患者外周血ALT、AST、TBIL复常、HBV DNA载量低于参考值(500IU/m L),较治疗前比较差异有统计学意义(P<0.01)。2.健康体检者组与HBV携带者组T淋巴细胞亚群间比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗前51例CHB患者外周血T淋巴细胞亚群表达水平明显降低,较健康体检者组及HBV携带者组比较差异有统计学意义(P<0.01);治疗组患者在抗病毒治疗4周、12周时外周血T淋巴细胞亚群表达水平均呈上升趋势,较抗病毒治疗前比较差异有统计学意义(P<0.01),较健康体检者组、HBV携带者组比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗组患者在抗病毒治疗第24周后外周血T淋巴细胞亚群表达水平明显升高,较治疗前比较差异有统计学意义(P<0.01)。3.健康体检者组与HBV携带者组外周血sPD-1、sPD-L1表达水平间比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗前51例CHB患者外周血sPD-1、sPD-L1表达水平明显升高,较健康体检者组及HBV携带者组比较差异有统计学意义(P<0.01);治疗组抗病毒治疗第4、12周时sPD-1、sPD-L1表达水平明显下降,较治疗前比较差异均有统计学意义(P<0.01);治疗组在抗病毒治疗第24周时外周血sPD-1、sPD-L1表达水平显著降低,较治疗前比较差异有统计学意义(P<0.01),较健康体检者组、HBV携带者组比较差异无统计学意义(P>0.05)。4.治疗前32例HBe Ag(+)与19例HBe Ag(-)组间sPD-1、sPD-L1水平比较差异无明显统计学意义(P>0.05);治疗前HBe Ag(+)与HBe Ag(-)组患者外周血sPD-1、sPD-L1表达水平较健康体检者组及HBV携带者组均明显升高,二者间比较差异有统计学意义(P<0.01);抗病毒治疗第4、12周时HBe Ag(+)与HBe Ag(-)组sPD-1、sPD-L1表达水平明显下降,与治疗前比较差异均有统计学意义(P<0.01);抗病毒治疗第24周时HBe Ag(+)与HBe Ag(-)组外周血sPD-1、sPD-L1表达水平较治疗前显著减少,差异有统计学意义(P<0.01),较健康体检者组、HBV携带者组水平高,二者间比较差异无统计学意义(P>0.05),。5.治疗前CHB患者外周血ALT与AST表达水平之间呈正相关关系(r=0.736,P=0.000);ALT、AST与TBIL表达水平之间均呈正相关关系(r=0.376,P=0.007;r=0.589,P=0.000);ALT表达水平与HBV DNA载量之间呈正相关(r=0.492,P=0.000);AST、TBIL与HBV DNA载量间均无相关性(r=0.029,P=0.839;r=0.492,P=0.087)。治疗24周后治疗组患者外周血中ALT与AST、TBIL表达水平间无相关性(r=0.012,P=0.935;r=-0.023,P=0.875);AST与TBIL表达水平间呈正相关性(r=0.373,P=0.007);ALT、AST、TBIL表达水平与HBV DNA载量间均无相关系(r=0.053,P=0.711;r=-0.059,P=0.682;r=0.080,P=0.577)。6.治疗前CHB患者ALT、AST、TBIL表达水平及HBV DNA载量与sPD-L1水平间呈正相关关系(r=0.451,P=0.001;r=0.460,P=0.001;r=0.434,P=0.001;r=0.359,P=0.010);ALT、AST、TBIL表达水平、HBV DNA载量与sPD-1水平间均无相关性。治疗24周后CHB患者外周血中ALT、AST、TBIL表达水平、HBV DNA载量与sPD-1及sPD-L1水平间均无相关性。7.治疗前CHB患者sPD-1与CD3+T与CD4+T、CD8+T淋巴细胞亚群水平呈正相关(r=0.403,P=0.003;r=0.408,P=0.00;r=0.372,P=0.007);sPD-1与sPD-L1表达水平均无相关关系(r=-0.038,P=0.794);sPD-L1与CD3+T、CD4+T、CD8+T淋巴细胞亚群表达水平无明显相关性。治疗24周后治疗组患者外周血中sPD-1、sPD-L1与CD3+T、CD4+T、CD8+T淋巴细胞亚群表达水平均无明显相关性。结论:1.抗病毒治疗能有效抑制HBV DNA复制,减轻肝组织炎症,促进肝功能复常。2.CHB患者外周血sPD-1、sPD-L1及T淋巴细胞亚群表达水平失衡,抗病毒治疗后sPD-1、sPD-L1表达水平逐渐降低,CD3+T、CD4+T、CD8+T淋巴细胞亚群表达水平复常。3.CHB患者外周血sPD-1、sPD-L1表达水平与HBe Ag的表达模式无相关性。4.sPD-L1与ALT、AST、TBIL表达水平及HBV DNA载量间呈正相关关系,提示sPD-L1可能参与了CHB的发生发展。5.CHB患者sPD-1与CD3+T与CD4+T、CD8+T淋巴细胞亚群表达水平呈正相关关系,提示sPD-1可能参与了阻断PD-1/PD-L1的通路,促进淋巴细胞活化增殖相关。