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目的:研究去甲斑蝥素(NCTD)在体外对人肝癌HCC-LM3细胞生长的影响以及同5-氟尿嘧啶(5-FU)联合应用是否能够产生协同作用;观察去NCTD对人肝癌HCC-LM3细胞迁移能力的影响并同5-FU联合应用是否能够共同抑制肿瘤细胞的迁移;通过建立人肝细胞癌裸鼠皮下移植瘤模型观察药物对肿瘤的生长以及转移的抑制作用，并通过病理检测、免疫组化的方法检测肿瘤组织的坏死情况以及肿瘤血管生成情况，应用超声弹性成像检测肿瘤组织的弹性程度，Western-Blot检测VEGFA、MMP-9、TIMP-1、β-catenin和E-cadherin蛋白在肿瘤组织中的表达。探讨去NCTD抗肝癌的作用机制以及与5-FU联合用药是否产生协同作用，为该药进一步合理运用临床以及中西医结合治疗肝癌提供部分理论和实验依据。 方法:通过细胞增殖实验检测NCTD以及联合5-FU用药对人肝癌HCC-LM3细胞体外增殖的影响;通过Transwell1小室实验检测NCTD以及联合5-FU用药对人肝癌HCC-LM3细胞迁移能力的影响。同时应用人肝癌HCC-LM3细胞建立人肝细胞癌裸鼠皮下移植瘤模型，将造模成功的24只裸鼠随机分为4组，分组及用药:(1)模型组:生理盐水腹腔注射0.2ml/只;(2)去甲斑蝥素组（NCTD组）:NCTD腹腔注射8mg/kg;(3)5-氟尿嘧啶组（5-FU组）:5-FU腹腔注射8mg/kg;(4)联合用药组（NCTD+5-FU组）:NCTD8mg/kg+5-FU8mg/kg腹腔注射，每周用药2次，一共连续用药8次。动物用药结束后，应用超声弹性成像技术检测肿瘤组织的弹性程度，超声检测结束后采取脱颈椎的方法快速处死裸鼠，剥离裸鼠的瘤块并称重，测量大小，计算肿瘤抑制率，HE染色法检测肿瘤组织坏死程度，免疫组化检测肿瘤微血管密度(MVD)，Western-Blot检测VEGFA、MMP-9、TIMP-1、β-catenin和E-cadherin蛋白在肿瘤组织中的表达。 结果:NCTD在低浓度时对人肝癌细胞HCC-LM3的杀伤作用很弱，但随着浓度的加大，杀伤作用愈加明显，药物对细胞的抑制率同浓度和时间呈正相关依赖关系。两药联合应用对HCC-LM3细胞的抑制作用要高于两药单独应用，这种对比在高浓度下更佳明显，但在24h低浓度时，5-FU单独用药对HCC-LM3细胞的抑制率高于联合用药。5-FU24h、36h、48h IC50分别为179.03、32.99、9.07μg/ml; NCTD24h、36h、48h IC50分别为11.58、5.93、3.32μg/m;联合用药24h、36h、48h IC50分别36.48、13.83、10.03μg/ml。联合用药作用三个时间点的IC50低于5-FU单独用药时的IC50。其中，5-FU在联合用药IC50中所占的浓度分别为33.17、12.57、9.64μg/ml，NCTD为3.32、1.26、0.96μg/ml。两者联合用药在24h时，fa约＞0.35时产生协同作用，在36h(fa约＞0.4)和48h（fa约＞0.55）时则产生协同作用。NCTD可以抑制HCC-LM3细胞的迁移，与5-FU联合应用会产生更明显的效果，差异具有统计学意义，NCTD与5-FU相比，5-FU抑制细胞迁移的效果更好，差异也有统计学差异。利用HCC-LM3细胞进行裸鼠肝细胞癌皮下移植瘤造模，可以在体表出现新的转移瘤。通过体内实验发现，与NS组相比，NCTD、5-FU以及两者联合用药均对人肝细胞癌皮下移植瘤的生长有抑制作用。NS组瘤体体积最大，NCTD以及5-FU组瘤体体积次之，联合用药组瘤体体积最小，但裸鼠体重治疗前与治疗后无明显差别。根据公式计算实验药物对肿瘤的抑制率，NCTD与5-FU联合用药效果最好，抑瘤率达到84.71％，5-FU组及NCTD组紧随其后。超声弹性成像结果显示，弹性图像肿瘤组织的病灶范围要大于二维图像肿瘤组织的病灶范围，但各组之间的AR(Area Ratio)并无太大差异，统计学检测也无意义。根据CD34阳性结果判断MVD值，各药物组均能不同程度的减少肿瘤微血管的形成，NCTD和5-FU联合用药对肿瘤微血管的形成的抑制作用最为明显，有明显统计学差异。各组裸鼠肿瘤组织通过western-blot检测，结果显示:NCTD可以下调VEGFA、MMP-9、β-catenin在肿瘤组织中的表达，同时上调E-cadherin和TIMP-1在肿瘤组织中的表达，同5-FU联合应用对于蛋白的调控作用优于两者单独用药，NCTD组与5-FU组相比没有一定的规律性。 结论: 1.NCTD以剂量-时间线性关系抑制人肝癌HCC-LM3细胞的增殖;在产生相同抑制率的情况下，NCTD与5-FU联合用药中各自所需药物浓度低于两药单独应用时各自所需药物浓度;两者联合用药对肿瘤细胞的抑制作用优于两者单独用药并可以在一定的剂量和时间范围内产生协同作用。 2.NCTD可以抑制人肝癌生长迁移并抑制肿瘤血管的生成，与5-FU联合用药的效果要优于单独用药。 3.NCTD可以调控与侵袭转移有关的蛋白VEGFA、MMP-9、β-catenin、E-cadherin和TIMP-1的表达以及抑制肿瘤血管的生成从而抑制肝癌的生长与侵袭转移。 4.超声弹性成像技术可以在一定程度上评价肿瘤性质。