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本研究以杂交鲟(西伯利亚鲟Acipenser baerii♀×施氏鲟A.schrenckii♂)幼鱼为研究对象,探索其对饲料中肌醇的最适需求量,及饲料中添加肌醇对杂交鲟消化率、肠道微生物菌群的影响。以酪蛋白、明胶、鱼粉和豆粕为蛋白源,糊精为糖源,鱼油和大豆油为脂肪源,分别配制肌醇水平为0、200、400、800、1600和3200 mg/kg的实验饲料,实际测得饲料中肌醇水平为70.2、130.0、270.2、443.0、1096.6和1997.3 mg/kg,共设6个实验组,每组三个重复,每个重复15尾初始体重为28.28±0.41 g的杂交鲟幼鱼,在18.2℃-20.6℃水温条件下采用表观饱食方法投喂杂交鲟12周。研究结果如下:1、杂交鲟幼鱼对饲料中肌醇的需求量本实验旨在探索杂交鲟幼鱼对肌醇的最适营养需求量,通过测定其生长性能和肝脏肌醇蓄积量指标进行评定。结果表明:(1)随着饲料中肌醇从0 mg/kg增加到400 mg/kg,增重率(WG)也从903.7±25.6 g增加到996.1±55.6 g(p<0.05),但随着肌醇添加量从800 mg/kg增加到3200 mg/kg,增重率无显著性差异(p>0.05),分别为1017.9±18.2 g、1040.9±32.7 g和1029.8±58.9 g。特定生长率(SGR)也呈现出相似的趋势。饲料中添加肌醇对杂交鲟幼鱼的饲料转化率(FCR)和存活率(SR)没有产生显著性差异(p>0.05)。(2)饲料中添加肌醇对杂交鲟幼鱼肌肉及全鱼的粗蛋白质、粗灰分含量没有显著性影响(p>0.05),而对肌肉和全鱼的粗脂肪和水分含量有显著性影响(p<0.05)。(3)饲料中添加1600 mg/kg肌醇时杂交鲟幼鱼的血清甘油三酯(TG)最低,为6.8 mmol/L;谷草转氨酶(AST)在添加量为800mg/kg时,其水平显著低于其它组,为387.4 U/L;谷丙转氨酶(ALT)水平随肌醇水平先降低后升高,并于800和1600 mg/kg时获得最低水平,分别为80.7和83.2 U/L。(4)肝脏蓄积量随饲料中肌醇从0 mg/kg增加到800 mg/kg而显著增加(p<0.05),但在1600 mg/kg后趋于平缓(p>0.05)。总的来说,以生长性能和肝脏肌醇蓄积量作为评价指标,并以最大增重率和最大肝脏蓄积量为基础,经二次折线模型分析得出杂交鲟幼鱼对肌醇的最适需求量分别为335.84 mg/kg和590.65 mg/kg。2、饲料中添加肌醇对杂交鲟幼鱼消化率和抗氧化性能的影响本实验探索饲料中添加肌醇对杂交鲟幼鱼消化率和抗氧化性能的影响。结果表明:(1)0 mg/kg和200 mg/kg组干物质的表观消化率为49.46±0.93%和48.16±1.43%,显著低于400、800、1600和3200 mg/kg组的消化率(p<0.05),分别为57.18±0.29%、56.43±0.80%、52.19±0.97%和54.09±1.01%。(2)饲料中添加过量或不足的肌醇显著降低了杂交鲟幼鱼对饲料中粗脂肪的表观消化率;饲料中添加0、1600和3200 mg/kg肌醇时其粗脂肪表观消化率显著比添加200、400和800 mg/kg肌醇时低(p<0.05),并在添加3200 mg/kg肌醇时最低,为48.71±5.13%;显著低于其它各组(p<0.05)。(3)饲料中添加肌醇对杂交鲟幼鱼的粗蛋白质表观消化率无显著影响(p>0.05)。(4)3200 mg/kg组总氨基酸表观消化率最低(p<0.05),为78.18±10.55%。(5)饲料中肌醇的添加对杂交鲟幼鱼肝脏过氧化氢酶(CAT)活性未产生显著影响(p>0.05),但饲料中添加400、800和1600mg/kg肌醇时显著增加了杂交鲟幼鱼肝脏总抗氧化能力(T-AOC)的活性;丙二醛(MDA)的含量也随肌醇的增加而增加;超氧化物歧化酶(SOD)的活性在添加0和3200mg/kg肌醇时最高(p<0.05)。上述结果表明,饲料中添加一定量的肌醇(400~800mg/kg)可以提高杂交鲟幼鱼对饲料中干物质、粗脂肪和氨基酸的表观消化率和抗氧化性能。3、饲料中添加肌醇对杂交鲟幼鱼肠道微生物菌群的影响为确定肌醇对杂交鲟幼鱼肠道微生物菌群的影响,本实验通过高通量测序技术探索饲料中添加不同肌醇水平对杂交鲟幼鱼肠道微生物菌群的组成、Alpha和Beta多样性的影响。结果表明:(1)杂交鲟幼鱼的后肠内容物经16s r RNA V3-V4区扩增子高通量测序,共获原始数据(Raw reads)和有效数据(Clean reads)分别为3339801和3194976条,每个样本测序的平均长度在400bp左右。对样本进行物种注释和均一化处理后共获得1381个OTUs,其中共有OTUs的数目为131个,特有OTUs的数目随饲料中肌醇的增加而逐渐从0到3200减少。(2)饲料中添加肌醇改变了杂交鲟幼鱼肠道微生物的优势菌群,随饲料中肌醇的添加优势菌群由变形菌门(Proteobacteria)变为梭杆菌门(Fusobacteria)和厚壁菌门(Firmicutes),且各组除0 mg/kg添加组优势菌群为变形菌门(Proteobacteria)外,其他都为梭杆菌门(Fusobacteria)。(3)饲料中肌醇的添加对杂交鲟幼鱼肠道微生物菌群Alpha多样性的Simpson指数没有影响,但对shannon指数、chao1指数和ACE指数存在显著影响。肠道微生物菌群Alpha多样性随饲料中肌醇的添加而变化,其中shannon指数随饲料中肌醇的添加而减少,0 mg/kg添加组显著高于其他各添加组,且各添加组无显著差异。Chao1和ACE指数在200 mg/kg添加组的最大,3200 mg/kg添加组最小。(4)饲料中添加肌醇显著影响杂交鲟幼鱼肠道微生物菌群Beta多样性。PCo A分析结果表明,饲料中添加肌醇使得杂交鲟幼鱼肠道的微生物群落结构在各组间呈现出高的相似度,亲缘关系较近,肌醇对其有显著影响。PCA分析结果表明,0 mg/kg在PCA图中的距离最远,其它各组呈现高度聚集,组间物种组成差异较小。综上所述,饲料中添加肌醇对杂交鲟幼鱼肠道微生物菌群组成、Alpha多样性和Beta多样性均有影响,饲料中添加肌醇改变了肠道的优势菌群,使肠道微生物菌群具有较高的丰富度和多样性。