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目的：
研究IGF1R、IGF1、IGF结合蛋白3(IGFBP3)在不同卵巢肿瘤中的表达及在原发性卵巢上皮性癌(PEOC)中的临床病理意义，探讨IGF1R在PEOC中的过表达及其与PECO临床病理特征间的相关性，提出以IGF1R为靶点的RNA干扰的必要性：在人卵巢上皮性癌细胞HO8910PM中利用IGF1RsiRNA有效抑制IGF1R表达，对其生物学功能、作用机制以及增强细胞对顺铂的敏感性进行研究；建立人卵巢上皮性癌细胞裸鼠移植瘤模型，观察IGF1RsiRNA的在体抑瘤效果及联合顺铂的抑瘤作用，为IGF1RsiRNA用于卵巢癌基因治疗的可行性提供体内外实验依据。
研究分为以下4部分进行：
一、IGF1、IGF1R及IGFBP3在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其临床病理意义
方法：
采用免疫组化法检测10例正常卵巢组织、13例良性卵巢上皮性肿瘤、12例交界性卵巢上皮性肿瘤、50例原发性卵巢上皮性癌(PEOC)手术病理标本中IGF1、IGF1R、IGF结合蛋白IGFBP3的表达，并分析其与PEOC临床病理特征之间的相关性。
结果:
1、IGF1、IGF1R、IGFBP3在正常卵巢组织、良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤、PEOC中的表达均依次增强(p均＜0.01)。
2、在PEOC中，IGF1R表达阳性程度与病理学分级、临床分期、腹水/腹腔冲洗液阳性之间存在显著性正相关(p均＜0.05)；IGFBP3表达的阳性程度与临床分期存在显著性负相关(p=0.023)。IGF1R表达程度与IGF1表达程度间存在显著性正相关(p=0.042)。
结论：
卵巢上皮性癌中存在IGF1R的过表达，并与PEOC的重要临床病理指标间存在相关性，在PEOC发生发展中发挥重要作用，IGF1R可作为卵巢上皮性癌基因治疗的新靶点。
二、胰岛素样生长因子及其受体在卵巢癌HO8910PM细胞增殖中的作用
方法：
以不同浓度的IGF1作用于人卵巢浆液性癌细胞系HO8910PM细胞，通过CCK-8法检测IGF1的促增殖活性；在脂质体介导下转染IGF1RsiRNA，通过real-timePCR、Westernblot验证IGF1RmRNA、蛋白表达水平的抑制效果；转染IGF1RsiRNA48h后给予IGF1刺激，检测IGF1RsiRNA对IGF1促细胞增殖的抑制效应。
结果:
1、IGF1作用48h后可明显刺激细胞增殖(p＜0.05)。
2、IGF1RsiRNA有效抑制IGF1R在转录及翻译水平的表达(p＜0.05)。(3)转染IGF1RsiRNA可明显抑制IGF1的促细胞增殖效应(p＜0.05)。
结论：
IGF1通过IGF1R途径促进HO8910PM细胞的增殖，IGF1RsiRNA可以有效抑制该途径的作用。
三、RNA干扰技术抑制卵巢癌HO8910PM细胞IGF1R表达及增强顺铂敏感性的实验研究
方法：
IGF1RsiRNA转染后通过CCK-8测定不同时间的细胞增殖情况，并测定转染24h后给予不同浓度的顺铂作用24h的细胞增殖抑制率；转染后24h给予10ug/ml顺铂作用24h，通过流式细胞分析术及Westernblot分别检测细胞凋亡和bcl-2蛋白水平变化；转染后给予IGF1刺激，通过Westernblot检测Akt、ERK的变化。
结果:
1、IGF1RsiRNA可明显抑制细胞增殖(p＜0.01)，并使细胞G2期阻滞(p＜0.05)。
2、IGF1RsiRNA联合顺铂作用细胞增殖明显被抑制(p＜0.01)、细胞凋亡率显著增加(p＜0.05)、bcl-2蛋白表达明显下调。
3、IGF1RsiRN可使Akt、ERK磷酸化水平明显下调。
结论：
1、IGF1RsiRNA显著抑制细胞增殖，诱导细胞G2期阻滞。
2、IGF1RsiRNA可明显提高细胞对顺铂的化疗敏感性。3、IGF1RsiRNA通过PI3K/Akt及ERK途径发挥生物学效应。
四、IGF1RsiRNA对人卵巢癌HO8910PM细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用及增强顺铂的抑瘤效果
方法：
通过皮下注射HO8910PM细胞建立人卵巢上皮性癌裸鼠移植瘤模型，将化学修饰的IGF1RsiRNA注射入肿瘤局部，观察肿瘤生长情况，同时对使用顺铂腹腔注射及IGF1RsiRNA联合顺铂应用的效果进行观察。通过Western印迹法及免疫组化法检测肿瘤组织中IGF1R的蛋白表达，对瘤体组织病理切片进行HE染色观察大体情况，通过TUNEL检测观察肿瘤组织中凋亡细胞。
结果:
1、IGF1RsiRNA明显抑制移植瘤的生长，显著增强DDP的抑瘤效果。
2、IGF1RsiRNA有效抑制肿瘤组织中IGF1R的蛋白表达。
结论：
IGF1RsiRNA瘤内注射可以明显抑制移植瘤肿瘤的生长，与顺铂联合应用的抑瘤作用更加显著。
小结：
IGF1R在卵巢上皮性癌中过表达，与PEOC的病理学分级、临床分期、腹水/腹腔冲洗液阳性之间存在显著性正相关。在卵巢上皮性癌细胞系HO8910PM中利用IGF1RsiRNA有效下调IGF1R的表达，通过PI3K/Akt及ERK途径发挥作用，明显抑制细胞增殖，诱导周期阻滞，增强细胞对顺铂的敏感性。在体内实验中，IGF1RsiRNA在人卵巢上皮性癌裸鼠移植瘤模型中发挥显著的抑瘤效果，并明显增强顺铂的抑瘤作用，为卵巢上皮性癌的基因治疗提供了体内外实验依据。