病毒一方面改变宿主细胞以满足自身复制的需要：而另一方面，宿主细胞面临病毒复制带来的压力也会改变自身的机制来保护自己。许多病毒的感染会导致宿主细胞周期的阻滞，如细小病毒、疱疹病毒、逆转录病毒等等。但是在杆状病毒的研究领域，有关杆状病毒与宿主细胞周期相互关系的研究较少。我们以HaSNPV—Hz细胞为实验系统，研究杆状病毒的感染对昆虫细胞周期进程和周期蛋白的影响。实验结果如下： 1．正常Hz细胞周期各个时相的分布和时间间隔 通过FACS分析不同步的正常Hz细胞，发现47-53％的细胞处于G₁期；20-27％的细胞处于S期；33-20％的细胞处于G₂/M期；并且没有异倍体（＞4N DNA）细胞的出现。羟基脲可以将Hz细胞抑制于细胞周期的G₁期。加入终浓度为60ug/ml的羟基脲作用24hr后，74％的Hz细胞被抑制于细胞周期的G₁期。通过细胞周期抑制剂抑制并释放细胞来测定细胞周期各时相之间的时间间隔，FACS分析发现Hz细胞完成整个细胞周期时间大概为40hr；G₁期到S期的时间为10hr；S期到G₂/M期的时间为14hr；G₂/M期到G₁期的时间为16hr。 2．HaSNPV的感染对Hz细胞周期进程的影响 HaSNPV感染不同步的Hz细胞，病毒感染后的8hr，处于G₂/M期的细胞数量开始增加，有44％的细胞被抑制在G₂/M期，这种对细胞周期的抑制完成于HaSNPV感染后24hr左右，抑制于G₂/M期达到70％左右。FACS分析发现HaSNPV感染24hr后，出现了14.3％的异倍体（＞4N DNA）细胞；当HaSNPV感染72hr时，异倍体（＞4N DNA）细胞的数量达到最大值，并且细胞的异倍体化现象随着感染时间延长越趋明显。用HaSNPV感染同步于G₁期的Hz细胞，同样发现HaSNPV感染可以将细胞抑制于G₂/M期。 ／左白八硕士学位论文 ＼枯宗不y NIu＊ER’S TI IFSIS3．HaSNPV白感染对Hi 全胞周期蛋白的影晌 HaSNPV感染不同步的k细胞，CyclinB；表达量在病毒感染后的16hr开始升高，在感染后的24hr达到高峰。用HaSNPV感染同步于G；期的k细胞，同样发现HaSNPV感染导致CyclinB；表达量升高。通过共聚焦激光扫描显微镜对正常k细胞和 HaSNPV感染 48hr后细胞中的 CyclinB；进行了定位，发现在正常的k细胞中 Cycl niB；在细胞核和细胞质中都有分布，而在 HaSNPV感染48hr的k细胞中CyclinB大部分都存在于细胞质中，说明HaSNPV感染极有可能是将细胞抑制于细胞周期的G。期。我们还发现HaSNPV的感染对k细胞对CyclinA的表达水平基本没有影响。