目的：构建SPAG6基因全长及六个不同长短ARM序列的真核表达载体pEGFP-N2-SPAG6-△ARM，探讨融合蛋白在细胞内表达及定位。观察全长及六个ARM结构缺失后对真核细胞CHO细胞中SPAG6蛋白定位的影响。方法：1.利用NCBI数据库，寻找小鼠SPAG6蛋白的保守功能区，分析全长蛋白序列，检索出SPAG6有七个ARM区域；2.以健康成年雄性小鼠的睾丸组织为来源，建立小鼠睾丸cDNA文库；3.以小鼠睾丸cDNA文库为模板，PCR扩增SPAG6全长及六个不同长短ARM结构的编码序列；4. TA克隆后测序；5.构建携带不同长短ARM序列的真核表达载体pEGFP-N2-SPAG6-△ARM，对阳性克隆进行酶切和测序鉴定，将构建的重组质粒转染到CHO细胞中；6.分别提取细胞蛋白进行Western blot检测，利用共聚焦激光扫描显微镜观察七个不同SPAG6/GFP融合蛋白在CHO细胞内的定位。结果：酶切和测序鉴定表明，全长及六个缺失不同长短ARM结构的真核表达质粒构建成功，转染实验发现重组质粒均能够在CHO细胞中表达，但仅全长表达产物定位于微管，缺失任何一个ARM区域都可影响在细胞中的微管定位。结论：SPAG6在真核细胞内的正确定位依赖于全长。该研究为进一步研究SPAG6蛋白的结构与功能奠定基础。