研究背景：PKD作为细胞内广泛表达的蛋白激酶,其在肿瘤中的研究尚处于起步阶段。目前研究证明,PKD在细胞内的激活主要受G蛋白偶联受体(GPCR)调控。GPCR在受到胞外信号刺激时,产生第二信使DAG。DAG通过激活PKC或者直接作用使PKD激活。磷酸化的PKD由胞膜转移至核内,参与有丝分裂信号级联,同时与β-catenin、HDAC、ERK、NF-κB、JNK等信号分子产生广泛的Crosstalk。某些激素或细胞因子如胃泌素、血管加压素等通过激活PKD,进而影响肿瘤细胞的增殖、分化、凋亡等生物学行为。PKD在细胞增殖、迁移等生物学行为的调控上起到了非常重要的作用。PKD通过结合JNK和ERK1/2,调控JNK、ERK及c-Jun的磷酸化和活性,进而刺激细胞增殖；PKD还可以通过促进整合素募集,影响肿瘤细胞侵袭；并且,PKD还参与到调节应激和疾病的状态。PKD分为三个亚型,PKD1, PKD2和PKD3。PKD的不同亚型在不同的恶性肿瘤中作用各异。PKD1是研究较为广泛的亚型,在乳腺癌、前列腺癌等肿瘤中的研究发现,PKD1可以抑制肿瘤增殖迁移,并参与维持上皮细胞表型。部分研究认为PKD2和PKD3可以起到促进细胞恶性转化的作用。PKD2与PKD1分子结构部分相似,但在其激活途径及对下游通路的影响不完全相同。在不同的恶性肿瘤中,PKD1和PKD2的过表达或表达缺失能引起不同的效用。研究目的：PKD2与肺癌的发生及恶性程度是否相关,PKD2如何影响细胞的生物学特性,通过哪些通路发挥作用,以及PKD2作为肺癌治疗新靶点是否可行。研究方法：1.取33例肺癌患者的肿瘤组织(T)和正常组织(N)做RT-PCR,得到的结果通过配对t检验证实PKD2的表达在肿瘤与正常组织中是否有差异。2.对这33例患者的临床资料进行分析,验证PKD2能否作为预后相关因素,以及PKD2的表达与患者的临床病理资料是否相关。3.已知PKD2在部分肿瘤细胞系(如A549)中为高表达,以此细胞系进行实验,验证转染PKD2siRNA后细胞的活性。4.利用高表达PKD2细胞系(A549)验证PKD2对细胞的生物学效应。5.利用western blot验证转染组与正常组中可能与PKD2相关的通路中关键因子的激活情况,验证PKD2可能的作用通路。研究结果：1.PKD2在正常组织与肿瘤组织中的表达无明显差异,且PKD2表达与患者临床病理参数无明显相关,同时,PKD2的表达与患者生存时间无明显关联。2.细胞实验证实,PKD2转染敲除可以明显抑制细胞活性及增殖。3.western blot证实PKD2可以影响p-ERK. p-S6K1、p-S6、p-Akt的活化情况。结论：1.PKD2在肿瘤与正常组织中表达无明显差异,并且PKD2的表达和生存时间无明显联系。2.敲除PKD2可以诱发细胞增殖下降。3.PKD2可能通过调节P70、ERK、AKT、S6的激活影响肿瘤细胞的增殖等特性。4.PKD2在肿瘤发展中可能起到促进肿瘤的作用。意义：PKD2能够促进肿瘤发生发展,并且PKD2在组织中的表达具有一定的特异性,可以考虑将其作为一个分子靶点进行药物研制。