Talin1与原发性肝癌的侵袭和迁移

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目的:通过体外培养不同来源人肝癌细胞株及人正常肝脏细胞株,模拟人原发性肝癌的不同组织学亚型及人正常肝脏模型,检测talin在各细胞株中的表达差异及各细胞株侵袭和迁移能力,探讨talin与不同来源人肝癌细胞侵袭及迁移的关系,进而为进一步研究talin与肝癌的侵袭和迁移的可能机制提供理论基础。方法:体外培养人高转移肝癌细胞株(MHCC-97H细胞株)、人低转移肝癌细胞株(MHCC-97L细胞株)、人肝癌SMMC-7721细胞株、人肝癌BeL-7402细胞株、人肝癌HePG-2细胞株及人正常肝脏细胞株(LO2细胞株),至对数生长期,利用RT-PCR技术检测各细胞株中talin-1的mRNA表达水平,Western-blot技术检测各细胞株中talin-1的蛋白表达水平,Transwell侵袭和迁移实验及细胞划痕实验检测各细胞株侵袭及迁移能力,软琼脂集落形成实验检测各细胞株增殖和克隆能力。结果:五种人肝癌细胞株中Talin-1的mRNA表达水平不同(P<0.05),与正常人肝脏细胞相比,MHCC-97L细胞株中Talin-1的mRNA表达比LO2细胞株高(P<0.0001),MHCC-97H细胞株和SMMC-7721细胞株中Talin-1的mRNA表达比LO2细胞株低,但不具有统计学意义(P>0.05),Bel-7402细胞株和HePG-2细胞株中Talin-1的mRNA表达比LO2细胞株低(P<0.0001);五种人肝癌细胞株中Talin-1蛋白表达水平和mRNA表达相似,MHCC-97L细胞株中Talin-1的蛋白表达比LO2细胞株高(P<0.05);五种人肝癌细胞株的侵袭能力不同(P<0.05),与正常人肝脏细胞相比,高表达talin-1的MHCC-97L细胞株侵袭能力较低(P=1.0000),低表达talin-1的Bel-7402细胞株和HePG-2细胞株侵袭能力强(P<0.05),MHCC-97H细胞株和SMMC-7721细胞株介于两者之间(P=0.091和0.092,>0.05);与正常人肝脏细胞相比,五种人肝癌细胞株的迁移能力不同(P=0.0000),高表达talin-1的MHCC-97L细胞株迁移能力较低(P=0.052,>0.05),Bel-7402细胞株、SMMC-7721细胞株、 HePG-2细胞株和MHCC-97H细胞株的迁移能力较强(P<0.05);与正常人肝脏细胞相比,五种人肝癌细胞株的增值和克隆能力不同(P=0.00017),高表达talin-1的MHCC-97L细胞株的集落数是52,集落形成率是130%(P=0.185.>0.05),低表达talin-1的Bel-7402细胞株的集落数是64,集落形成率是160%(P<0.05),MHCC-97H细胞株、HePG-2细胞株和SMMC-7721细胞株介于两者之间。结论:1、不同来源的人肝癌细胞的侵袭和迁移能力不同;2、不同来源的人肝癌细胞株中的Talin-1的表达水平不同;3、Talin-1与肝癌的侵袭和迁移能力相关;4、高表达Talin1的原发性肝癌的侵袭和迁移能力低,恶性度低,低表达Talin1的原发性肝癌的侵袭和迁移强,恶性度高;5、Talin1可作为原发性肝癌恶性度的预测指标之一。
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