血小板生成素对大鼠阿霉素心脏毒性的保护作用及机制

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背景及目的:阿霉素(Adriamycin ,ADM)是一种广谱、高效的蒽环类抗肿瘤药物,临床上广泛用于治疗多种实体肿瘤、血液系统肿瘤。然而剂量累积性心脏毒性限制了它的长期使用,相关的机制包括氧化应激、线粒体损伤,钙超载,心肌细胞凋亡等。因此如何降低ADM所致的心脏毒性成了当前研究的重点。近年,人们在有关ADM心脏保护剂方面进行了大量的试验研究,并取得了不少成绩,但有关它们的临床应用效果仍并不十分满意,故有待开发新的心脏保护剂。血小板生成素(Thrombopoietin,TPO)是一种糖蛋白,具有促进早期造血干、祖细胞、骨髓巨核细胞增殖、分化及血小板生成的作用。最近有关其非造血系统的作用也逐渐被人们认识。已有实验证实TPO可通过抗心肌细胞凋亡来发挥阿霉素心脏损伤的保护作用,但是否存在其他机制目前仍不清楚。本研究拟通过测定血清心肌损伤标志物及心肌细胞病理改变来再次验证TPO对心脏的保护作用,并从抗氧化应激方面来进一步研究其保护作用机制。材料及方法:32只Wistar大鼠被随机分成4组,每组8只,分别为:阿霉素组(ADM组)ADM 20mg/kg,1次腹腔内注射于0天;阿霉素+血小板生成素低剂量组(ADM+TPOL)及阿霉素+血小板生成素高剂量组(ADM+TPOH)均在0天给予ADM(剂量及用法同前),同时于ADM应用前1天(-1天)及应用后1天(+1天)及第3天(+3天)共3次大鼠腹腔内注射TPO 10ug/kg或TPO 30ug/kg;对照组(Control)分别于-1天、0天、+1天、+3天腹腔内注射N.S 10ml/kg;各组大鼠均在+5天予2%戊巴比妥麻醉后取材。采用ELISA技术,测大鼠血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)及心肌肌钙蛋白I(cTNI)浓度;利用电子显微镜观察心肌细胞超微结构的变化;采用免疫组织化学染色对ADM损伤后大鼠心肌组织8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)进行检测,应用IPP6.0软件,测定每组切片3个部位的累积光密度(IOD),并计算相应的8-OHdG index。结果:正常对照组血清中CK-MB、cTNI活力均明显低于各实验组,加用TPO后大鼠血清CK-MB、cTNI活力较ADM组明显下降,但ADM+TPOL组及ADM+TPOH组两组间差别无显著性;电镜下,ADM组较对照组心肌组织超微结构改变明显,可见心肌细胞肿胀,肌丝断裂溶解,线粒体内水肿,而ADM+TPOL及ADM+TPOH组心肌纤维结构基本正常,线粒体轻度肿胀,可见少数肌丝断裂;免疫组化染色发现对照组IOD、8-OHdG index值较其他各组明显降低,ADM组IOD、8-OHdG index值较ADM+TPOL组及ADM+TPOH组明显升高,而ADM+TPOL组及ADM+TPOH组比较差别无显著性。结论:TPO对大鼠心脏有保护作用,可降低阿霉素的心脏毒性,抗氧化损伤为其心脏保护机制之一。
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